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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| HL-1 (小鼠心肌細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0591 |
商品介紹：
名稱 HL-1 (小鼠心肌細(xì)胞) 別稱HL1 年齡（性別）雌 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 背景描述HL-1 Cardiac Muscle Cell Line is an immortalized mouse cardiomyocyte cell line able to continuously divide and spontaneously contract while maintaining a differentiated cardiac phenotype. HL-1 can be serially passaged without losing its differentiated cardiac myocyte phenotype, including morphological, biochemical, and electrophysiological properties. HL-1 is used in a variety of model systems to address questions of cardiac biology at the cellular & molecular levels. 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:4-1:6 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5% 溫度：37℃ |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
DMKN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MIA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SUMO2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DBH 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ALDH1B1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CDK5RAP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CYP20A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SEZ6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IGSF8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ITGA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HL-1 (小鼠心肌細(xì)胞)TSN瓊脂 英文名稱：TSN Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pro-MCH
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Lysophosphatidic acid receptor 4
葡萄糖 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支
78-5000 pg/mL 西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Phosphoglycerate kinase 1
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Ovostatin homolog 2
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 4
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Prostaglandin G/H synthase 2
布魯氏菌培養(yǎng)基 英文名稱：Brucella Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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