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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-24 14:09:07瀏覽次數(shù)：486
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1406 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠浦肯野細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1406 |
商品介紹：
名稱 小鼠浦肯野細(xì)胞 2.組織來源：小腦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠浦肯野細(xì)胞分離自小腦皮質(zhì)組織；小腦的表面被覆著一層灰質(zhì),，叫小腦皮質(zhì),，小腦皮質(zhì)分為3層，從表及里分別為分子層,、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層,。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞、籃狀細(xì)胞,、浦肯野細(xì)胞,、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,，終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核,。浦肯野細(xì)胞（Purkinje cell）是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的能夠傳出沖動(dòng)的神經(jīng)元。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬個(gè)浦肯野細(xì)胞,。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室,。顯著的電生理特點(diǎn)是傳導(dǎo)性強(qiáng),，傳導(dǎo)速度快，可達(dá)4000mm/s,。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞,，具有舒張期自動(dòng)除極化的性能，因而有自律性,，但自律性強(qiáng)度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞,。這類細(xì)胞常常平行排列，細(xì)胞內(nèi)電阻低,，只有心室細(xì)胞的1/3,。小腦：浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中最大的神經(jīng)元，細(xì)胞體呈梨形,，頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹突,，向外伸入分子層。主樹突沿途分支繁茂,，形如展開的,、扁薄的扇形，鋪展在與小腦葉片長軸垂直的平面上,。樹突分支上有大量的樹突棘,，與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系，接受傳入小腦的全部信息,。軸突由細(xì)胞底部（與主樹突相對(duì)方向）發(fā)出,，細(xì)長，離開胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維,，向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì),，組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維，終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán),。一個(gè)浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個(gè)終末膨大,，約與小腦深部核團(tuán)的35個(gè)神經(jīng)元形成突觸。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列,，幾個(gè)細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個(gè)小束,，小束外包繞著基底膜。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少,，胞漿區(qū)內(nèi)充滿糖原顆粒,、線粒體和肌漿網(wǎng)，細(xì)胞內(nèi)電阻低,，只有心室細(xì)胞的1/3,。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無橫管系統(tǒng)，但膜電容比收縮細(xì)胞大,，可能是由于其閏盤結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜,，提供了較大的表面積的緣故,。浦肯野細(xì)胞閏盤的主要成分是縫隙連接，粒著膜占的比例很少,，這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ),。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠浦肯野細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠浦肯野細(xì)胞經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含脂質(zhì)濃縮液,、BSA,、Monothioglycerol、Transferrin,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M313 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)神經(jīng)元細(xì)胞樣 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 Syndecan-4 / SDC4 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 SIRPB1A / SIRP beta 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
PGA4 / Pepsinogen A 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
LSAMP 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 LAMP2 / CD107b 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
LSAMP 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
Serglycin / SRGN 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 ST6GAL1 / CD75 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠浦肯野細(xì)胞Aspergillus awamori脂多糖抗體檢測試劑盒
Aspergillus awamori脂肪甘油三酯脂檢測試劑盒
Aspergillus awamori脂肪檢測試劑盒
Aspergillus awamori脂肪酸合成檢測試劑盒
Aspergillus awamori脂肪酸脫氫檢測試劑盒
Aspergillus awamori脂褐質(zhì)檢測試劑盒
Aspergillus awamori脂聯(lián)素檢測試劑盒
Aspergillus awamori脂聯(lián)素受體1檢測試劑盒
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