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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-24 09:39:37瀏覽次數(shù)：266
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1359 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠羊膜胚胎細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1359 |
商品介紹：
名稱 大鼠羊膜胚胎細(xì)胞 2.組織來(lái)源：胎盤組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠胚胎羊膜細(xì)胞分離自羊膜組織,；羊膜為單層上皮細(xì)胞互相連接構(gòu)成的薄膜,。單層上皮細(xì)胞具有分泌羊水的作用。隨著胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育,，羊膜與絨毛密切緊貼,，形成胎膜。胎膜隨著羊膜腔逐漸擴(kuò)大而呈半透明的薄膜,，無(wú)血管,，富有韌性（胎膜也就是羊膜腔的囊壁）。羊膜腔內(nèi)充滿的液體為羊水,。羊膜僅覆蓋在胎盤的兒體面,，并不深入胎盤組織中,，隨著妊娠的進(jìn)展羊膜腔逐漸擴(kuò)大，占據(jù)整個(gè)子宮腔,，羊膜是胎膜最內(nèi)一層，是一層半透明的薄膜,，與覆蓋在胎盤,、臍帶的羊膜層相連接。羊膜是胎盤的最內(nèi)層,，與人眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的物質(zhì),，其光滑,，無(wú)血管、神經(jīng)及淋巴,，具有一定的彈性,，厚0.02~0.5mm，在電鏡下,，其分為五層：上皮層,、基底膜、致密層,、纖維母細(xì)胞層和海綿層,，羊膜基底膜和羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為i,、iii,、iv、v,、vii型膠原和纖維粘連蛋白,、層粘連蛋白等成份，正是這些成份使羊膜可以充當(dāng)“移植的基底膜"而發(fā)揮一種新的健康合適的基質(zhì),。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成,，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,，且還有合成,、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的功能。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠羊膜胚胎細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠羊膜胚胎細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R234 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
Galactolipase / PNLIPRP2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
RCN3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CNPY4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
ERP72 / PDIA4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
ERP72 / PDIA4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
TMEM27 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CLDN11 / Claudin-11 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CFHR1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠羊膜胚胎細(xì)胞α-連環(huán)蛋白抗體（鈣粘蛋白相關(guān)蛋白）Catenin αHuman CEP290 ELISA Kit人前列腺素D合成（PGDS）ELISA試劑盒,
癌易感基因2相互作用蛋白抗體Human CD4(T-cell surface glycoprotein CD4) ELISA Kit人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物（Hb-AGE）ELISA試劑盒,
質(zhì)連接蛋白1抗體Human CEP350 ELISA Kit大鼠雄（androgen）ELISA試劑盒,
盤狀結(jié)構(gòu)域受體蛋白2抗體Human CD9(CD9 antigen) ELISA Kit大鼠同型半胱（Hcy）ELISA試劑盒,
膜糖蛋白CD200抗體Human CEP44 ELISA Kit大鼠組織多肽抗原（TPA）ELISA試劑盒,
胰羧肽A1抗體Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit大鼠巨噬炎性蛋白3α（MIP-3α/CCL20）ELISA試劑盒,
羧肽A2抗體Human CEP55 ELISA Kit兔子可溶性CD40配體（sCD40L）ELISA試劑盒,
腦源性球蛋白超家族蛋白3抗體Human CD94 ELISA Kit抑制素β-B（Inhbb）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人
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