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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-19 15:21:26瀏覽次數(shù)：255
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1003 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1003 |
商品介紹：
名稱 大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞 2.組織來(lái)源：皮膚組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞分離自皮膚組織,；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用,。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,，即基底層,、棘層、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層,。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞，此類細(xì)胞為表皮的主體,，由表皮深層始逐漸增殖,、分化，并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中,，細(xì)胞核與細(xì)胞器*消失,，細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對(duì)機(jī)體尚有保護(hù)作用,，故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦,，使其過(guò)早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層,，在上皮程序性死亡后,，細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化,，不能充分增殖,。角質(zhì)形成細(xì)胞最終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白，在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過(guò)程中,，一般可以分為四層,，即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層,。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層,。此外，在某些部位,，特別在掌跖部位,，角質(zhì)層下方還可見(jiàn)到透明層。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先中性蛋白酶消化,、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R094 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 CD80 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 TNFSF13B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 ATP1B3 / LOC716682 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 IL2RA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 CD300LB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 IFITM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 TLR8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 TLR9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 ENPEP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 TLR3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人干擾素誘導(dǎo),雙激活蛋白激滯留RNA(EIF2AK2)ELISA試劑盒
大腸菌群培養(yǎng)基（日本） 英文名稱：Coliform Medium（Japan） 產(chǎn)品規(guī)格：250g
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：7.5ml*20支/盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Myogenin
15.6-1000 pg/mL 番茄特定基因序列PG)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 3
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Proteasome subunit beta type-9
V-J瓊脂培養(yǎng)基（USP） 英文名稱：Vogeljohnson Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
GC瓊脂 英文名稱：GC Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 病毒H9亞型(AIV-H9)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
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