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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-19 13:59:31瀏覽次數(shù)：242
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0947 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠心肌細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0947 |
商品介紹：
名稱 小鼠心肌細(xì)胞 2.組織來源：心臟組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠心肌細(xì)胞分離自心臟組織,；心臟是脊椎動(dòng)物身體中最重要的一個(gè)器官,，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分,。心臟由心肌構(gòu)成,，左心房、左心室,、右心房,、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,，故互不相通,，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,，而不能倒流,。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官,、組織提供充足的血流量,，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳,、無機(jī)鹽,、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能,。心肌細(xì)胞呈菱形,、多邊形等不規(guī)則形狀；細(xì)胞培養(yǎng)2h后開始貼壁,，呈梭形,；到12h左右，細(xì)胞開始伸出偽足,，呈菱形,、多角形；細(xì)胞分離培養(yǎng)48h以后,，大部分伸出偽足,、呈巴掌狀，部分心肌細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)搏動(dòng)；心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,，在體外不增殖,。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn),，并具有自發(fā)性節(jié)律搏動(dòng),，且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡便、定量,、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn),。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動(dòng)力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié)，研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué),、凋亡,、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理,、信號(hào)通路,、對(duì)作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對(duì)其安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景，對(duì)于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心肌細(xì)胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法，并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M073 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 GPX3 基因全長ORF克隆
大鼠 CYP4A3 基因全長ORF克隆
大鼠 SLC25A17 基因全長ORF克隆
大鼠 SERPINB3A 基因全長ORF克隆
大鼠 RASSF7 基因全長ORF克隆
大鼠 FAH 基因全長ORF克隆
大鼠 GLB1 基因全長ORF克隆
大鼠 NOB1 基因全長ORF克隆
大鼠 HMGCS2 基因全長ORF克隆
大鼠 FGA 基因全長ORF克隆
小鼠心肌細(xì)胞78-5000 pg/mL 人受體2(FOLR2)ELISA試劑盒
BCYE瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱：BCYE Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格：100g
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Mothers against decapentaplegic homolog 1
雙歧桿菌培養(yǎng)基 英文名稱：Bifidobacterium Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.47-30 nmol/L 人賴氨酰氧化樣蛋白3(LOXL3)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/ml 人觸珠蛋白相關(guān)蛋白ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 人脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CETP)ELISA試劑盒
液體大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基 英文名稱：SoybeanCasein Digest Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Microfibrillar-associated protein 5x
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