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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-22 12:21:37瀏覽次數(shù)：279
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1175 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1175 |
商品介紹：
名稱 大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞 2.組織來源：股骨,、脛骨 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞分離自股骨,、脛骨；骨內(nèi)膜是一層致密結(jié)締組織膜,，覆蓋在骨的表面（關(guān)節(jié)面除外）,，新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色，含有豐富的血管,、神經(jīng)和成骨細(xì)胞,。此外，附著于骨的肌腱,、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起,。因而骨內(nèi)膜與骨質(zhì)結(jié)合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管、神經(jīng),，通過骨質(zhì)的滋養(yǎng)孔分布于骨質(zhì)和骨髓,。骨內(nèi)膜分內(nèi)、外兩層,，外層主要是粗大的膠原纖維束,，部分纖維穿入骨質(zhì)，使骨內(nèi)膜固定于骨面,；內(nèi)層疏松,，含成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞（分別具有產(chǎn)生新骨質(zhì)和改建骨的功能）。骨髓腔和骨松質(zhì)的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結(jié)締組織膜,，叫做骨膜,。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的能力，以形成新骨質(zhì)和破壞,、改造已生成的骨質(zhì),，所以對(duì)骨的發(fā)生、生長(zhǎng),、修復(fù)等具有重要意義,。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞，可以向骨,、軟骨,、肌組織,、皮膚,、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞,。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高，在培養(yǎng)過程中,，受貼壁時(shí)間,、種植密度、血清含量,、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞采用沖洗骨髓、消化骨內(nèi)膜,、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R161 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
MTOR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
MTOR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
MTOR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
TrkA / NTRK1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
TGF-beta 1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
CCL20 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
HGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
TNFSF10 / TRAIL 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體, 密碼子優(yōu)化), 無標(biāo)簽
甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體, 密碼子優(yōu)化), 無標(biāo)簽
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞肉桂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，>99.5%（GC)香葉 98%Anti-CYP2C19 色素P450 2C19抗體
肉桂酸 ≥99.0%, FG香葉 97%Anti-CYP450 色素P450單氧化抗體
肉桂酸 天然, ≥99%, FCC香葉 Standard for GC, ≥99.0% (GC)Anti-Cyr61/IGFBP10/CCN1 富半胱肝素結(jié)合蛋白61抗體
香茅 85%,FCC乙酸香葉酯 96%Anti-CYP2E1 抗色素P450ⅡE1抗體
香茅 96%乙酸香葉酯 90%,，天然, FCC, Kosher Anti-Cytochrome C 色素 C抗體
肉桂 98%香葉基酮 97%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr220) 化Disabled 1抗體
肉桂 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99%（GC)甲酸香葉酯 85%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr232) 化Disabled 1抗體
正癸 Standard for GC,≥99.5% (GC)甲酸香葉酯 85%,FCC, KosherAnti-Phospho-Dab1 (Ser491) 化Disabled 1抗體
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