詳細介紹
細胞實驗步驟:
一、細胞復蘇
1.將10ml移液管,、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺,,紫外燈照射30min后再通風30min;
2.預熱培養(yǎng)基,;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出,;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中,;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;
9.1000r/min,離心5min,;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,,將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi),,補加適量培養(yǎng)基,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,,并做好標記,;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 人原代臍血DC細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP4146 |
人原代臍血DC細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代臍血DC細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代臍血DC細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于人原代臍血DC細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代樹突狀細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代樹突狀細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項:
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,,如有接觸,立即用自來水沖洗即可,。
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,,將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,,以去除懸浮在細胞表面的碎片,,重復幾次。
加入新的培養(yǎng)基,。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加入PBS緩沖液漂洗,。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面,。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。
吹打細胞使其成為懸液,轉(zhuǎn)移到離心管中離心,。
棄上清,,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,,補加新鮮培養(yǎng)基,。
做好標記,放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心,,棄上清,。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞,。
將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存,。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠酶(CAT)ELISA 試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
Rat immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒
humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)pcr檢測試劑盒分裝
HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSA試劑盒人抗0脂酰絲抗體(APSA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20次
HumaypeⅡcollagenhelicalpeptide,HELIX-ⅡELISAKit人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)試劑盒 ,,英文名: LOX1 ELISA Kit
Mouse platelet membrane glycoprotein B II (GP- II III a B III a/CD41+CD6 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD6
RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforGHELISAKit大鼠釋放激素
細胞酶3(PON3)活性熒光定量試劑盒
Ratthioredoxieductase,xRELISAKit大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠巨噬細胞游走抑制因子 英文名稱: macrophage migration inhibitory factor 英文縮寫: MIF
小鼠巨噬細胞性蛋白-1 英文名稱: Macrophage Inflammatory protein 1 英文縮寫: MIP-1
小鼠巨噬細胞性蛋白-2 英文名稱: Macrophage Inflammatory protein 2 英文縮寫: MIP-2
小鼠巨噬細胞性蛋白-3α 英文名稱: Macrophage Inflammatory protein 3α 英文縮寫: MIP-3α
EPG5蛋白抗體
骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體
RBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 Protein
BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活通道蛋白
VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein
CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標簽)
CLEC14A Protein Rat 重組
人原代臍血DC細胞專用培養(yǎng)基BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活通道蛋白
CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標簽)
RBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 Protein
CLEC14A Protein Rat 重組大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 標簽)
VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein