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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| D341Med(髓母細胞瘤細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0663 |
商品介紹：
名稱 D341Med(髓母細胞瘤細胞) 別稱D-341 Med; D-341 MED; D-341Med; D-341MED; D341_Med; D341Med; D341MD; D-341; D341; Med 341; H341 種屬人類 年齡（性別）男性,，3.5歲 組織來源腦干/小腦 生長特性半貼半懸 細胞形態(tài)淋巴母細胞 背景描述The D341 Med cell line was established in 1988 by Friedman et al. from tumor tissue taken from a boy with medulloblastoma. 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基MEM（ATCC改良)＋10% FBS＋1mM Sodium Pyruvate(PB180422)+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5% 溫度：37℃ |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
SIRPA 基因全長ORF克隆
PVRL1 基因全長ORF克隆
GBA3 基因全長ORF克隆
SULT1B1 基因全長ORF克隆
ALOX5AP 基因全長ORF克隆
LTC4S 基因全長ORF克隆
ADCK2 基因全長ORF克隆
NLK 基因全長ORF克隆
RPA2 基因全長ORF克隆
DKK4 基因全長ORF克隆
D341Med(髓母細胞瘤細胞) GN增菌液顆粒 英文名稱：Gram Negative Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Proheparin-binding EGF-like growth factor
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Triggering receptor expressed on myeloid cells 2
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Neuropeptide FF receptor 2
WPM培養(yǎng)基 英文名稱：WPM Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
7.8-500 pg/mL 人降鈣素(CT)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Methylmalonic Acid
62.5-4000 pg/mL ELISA Kit for Human Complement component 1 Q subcomponent-binding protein, mitochondrial
3.12-200 ng/mL 人腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白A1(ABCA1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人拓撲異構(gòu)Ⅱβ(TOP2β)ELISA試劑盒
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