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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-13 09:18:35瀏覽次數(shù)：325
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0737 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠肺動脈成纖維細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0737 |
商品介紹：
名稱 大鼠肺動脈成纖維細胞 2.組織來源：肺動脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠肺動脈成纖維細胞分離自肺動脈組織；肺動脈亦稱肺動脈干,。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,，在主動脈之前向左上后方斜行,，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,，經(jīng)肺門入肺,。肺動脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動脈干,。起自右心室,，在升主動脈前方向左后上方斜行，至主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,。左肺動脈較短,，在左主支氣管前方橫行，分二支進入左肺上,、下葉,。右肺動脈較長而粗，經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,，至右肺門處分為三支進入右肺上,、中、下葉,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來；成纖維細胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺動脈成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁*,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻,，散在生長,，不聚集成團；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài),，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長,，平坦,、胞體較大，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大,，呈橢圓形，顏色淡,。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。肺動脈成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺動脈的正常形態(tài),；合成和釋放細胞外基質(zhì)；組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織,。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠肺動脈成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠肺動脈成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R012 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
VAPB 基因全長ORF克隆
PRKCB 基因全長ORF克隆
Laforin / EPM2A 基因全長ORF克隆
DPP-II 基因全長ORF克隆
MAPK13 基因全長ORF克隆
Wnt-7b 基因全長ORF克隆
JNK2 基因全長ORF克隆
sFRP-5 基因全長ORF克隆
PDK4 基因全長ORF克隆
GP1BB 基因全長ORF克隆
大鼠肺動脈成纖維細胞31.2-2000 pg/mL 人乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-2-microglobulin
THB培養(yǎng)基 英文名稱：THB Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Oxidative stress-induced growth inhibitor 2
馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA） 英文名稱：Potato Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Glutathione S-transferase omega-1
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Angiotensinogen
煌綠黃胺瓊脂 英文名稱：Brilliant Green Agar w/Sulfadiazine 產(chǎn)品規(guī)格：250g
10%NaCl卵黃乳液 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5ml*10支
93.75-6000 pg/mL ELISA Kit for Human Neurotrophin-4
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