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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-22 10:20:33瀏覽次數(shù)：262
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1117 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1117 |
商品介紹：
名稱 大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 2.組織來源：腦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球,，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分,，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。每一個半球都有三個面,，即外側(cè)面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）,；半球表面有很多深淺不等的溝或裂,，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積,；大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔,，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉,、顳葉,、枕葉四大部分。神經(jīng)干細(xì)胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元,、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力,，能自我更新，并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群,。神經(jīng)干細(xì)胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞,，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。需要強調(diào)的是,，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,，不同的神經(jīng)干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同，分布也不同,。神經(jīng)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種,，它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能,，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細(xì)胞的能力,，這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應(yīng)能力,。神經(jīng)干細(xì)胞在疾病,、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,，并向神經(jīng)細(xì)胞,、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點,，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提,。神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經(jīng)球,，神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長,，予以更換半量培基，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細(xì)胞懸液,，將部分細(xì)胞接種到新的培養(yǎng)瓶中,，2×105個細(xì)胞/瓶，每7-10d傳代1次,，每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次,，培養(yǎng)條件不變。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠神經(jīng)干細(xì)胞采用胰蛋白酶消化后差速貼壁,，結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠神經(jīng)干細(xì)胞經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含B-27 Supplement,、EGF、bFGF,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R139 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細(xì)胞形態(tài)球形 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶，Accutase 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 IL22RA2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
Integrin beta5 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, CRF07_BC) GP120 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
HNF4A 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
POT1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
VSIG4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
ITGAV 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
雪貂 IFNG 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
AMD1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
大鼠神經(jīng)干細(xì)胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Keratin, type II cytoskeletal 1
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Protein O-linked-mannose beta-1, 2-N-acetylglucosaminyltransferase 1
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human B-lymphocyte antigen CD19
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Granzyme A
芽孢桿菌培養(yǎng)基 英文名稱：Bacillus Megatherium Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
平板計數(shù)瓊脂（PCA） 英文名稱：Plate Count Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interferon-induced transmembrane protein 10
乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 英文名稱：Lactose Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 人解偶聯(lián)蛋白2(UCP-2)ELISA試劑盒
胰蛋白胨大豆肉湯 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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