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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-22 14:01:06瀏覽次數(shù)：222
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1201 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1201 |
商品介紹：
名稱 乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來源：乳腺癌組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自患有乳腺癌的女性乳腺組織,；女性乳腺是由皮膚,、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的,，乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤,。乳腺癌中99%發(fā)生在女性，男性僅占1%,。乳腺并不是維持機(jī)體生命活動(dòng)的重要器官，原位乳腺癌并不致命,；但由于乳腺癌細(xì)胞喪失了正常細(xì)胞的特性,，細(xì)胞之間連接松散,，容易脫落。癌細(xì)胞一旦脫落,，游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身,，形成轉(zhuǎn)移，危及生命,。目前，乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞采用胰-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H171 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
RIPK1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
SETD7 / SET7 / 9 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
SETD7 / SET7 / 9 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
SETD7 / SET7 / 9 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
VEGFA 轉(zhuǎn)錄變體4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
VEGFA 轉(zhuǎn)錄變體4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
IL2RG 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
INHBA 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
TRAILR1 / TNFRSF10A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
BACE1 轉(zhuǎn)錄變體a 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞兔子可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體Anti-MyD88 Antibody人胃泌素抑制肽（GIP）elisa定量檢測(cè)試劑盒
兔脂蛋白αAnti-MYH14 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白23B（MMP23B）elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子Anti-MYH11 Antibody人角蛋白21-1片段（CYFRA21-1）elisa定量檢測(cè)試劑盒
植物鈣調(diào)素Anti-MYH14 Antibody人纖維介素蛋白（FGL2）elisa定量檢測(cè)試劑盒
人穿孔素/成孔蛋白Anti-MYL6 Antibody人TERF1相互作用核因子2（TINF2）elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠膽固Anti-MYH4 Antibody人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物（GTEAGE）elisa定量檢測(cè)試劑盒
人多效生長因子Anti-MYL7 Antibody人纖α（FGα）elisa定量檢測(cè)試劑盒
兔載脂蛋白EAnti-MYL9 Antibody人?；囸I素（A-GHRL） elisa定量檢測(cè)試劑盒
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