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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-18 15:27:06瀏覽次數(shù)：245
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0869 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 胃黏膜上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0869 |
商品介紹：
名稱 胃黏膜上皮細(xì)胞 2.組織來源：胃組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 人胃黏膜上皮細(xì)胞分離自胃黏膜組織,；胃黏膜柔軟,，活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞,，充盈時(shí)變平坦,。幽門處的黏膜形成環(huán)形皺襞，突向腔內(nèi)稱幽門瓣,。胃黏膜可分為三層,，即上皮層（單層柱狀上皮）、固有層（由結(jié)締組織構(gòu)成,、含有大量的胃腺）和黏膜肌層（為薄層平滑肌、排列成內(nèi)環(huán)外縱）,。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層,，細(xì)胞為單層柱狀上皮，排列整齊,，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面,，防止胃酸和胃蛋白酶對(duì)胃黏膜的損害。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子,、藥物,、激素對(duì)細(xì)胞的損傷、保護(hù)和功能調(diào)控提供了簡(jiǎn)單而*的模型,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人胃黏膜上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的人胃黏膜上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H048 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 EFNA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TFF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CHST3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 YWHAS / SFN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 EPHA4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CDK5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 FOLR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 FETUB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CNTN4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 ARMETL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
胃黏膜上皮細(xì)胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Caspase-7
0.312-20 ng/mL 人激肽釋放1(KLK 1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Neurogenic locus notch homolog protein 3
3.12-200 ng/mL 人線粒體鐵蛋白(FTMT)ELISA試劑盒
膽鹽七葉苷瓊脂 英文名稱：Bile Esculin Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
78-5000 pg/mL 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白ig-h3(Beta ig-h3)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human NF-kappa-B essential modulator
0.312-20 ng/mL 人血管緊張素轉(zhuǎn)化2(ACE2)ELISA試劑盒
0.78-50 nmol/L ELISA Kit for Homocysteine
醇發(fā)酵管-O157菌生化鑒定 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支
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