產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
大鼠小腦顆粒細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1043 |
商品介紹:
名稱 大鼠小腦顆粒細(xì)胞 2.組織來源:腦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 大鼠小腦顆粒細(xì)胞分離自小腦皮層組織;神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)與功能單位,,小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元,直徑約10μm,,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富,,近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半。由于小腦神經(jīng)元的生長(zhǎng),、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似,,而且數(shù)量多、便于取材,,因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長(zhǎng)發(fā)育,、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機(jī)制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段。小腦顆粒神經(jīng)元是小腦主要的中間神經(jīng)元,,在哺乳動(dòng)物的小腦內(nèi)數(shù)量最為豐富,。顆粒神經(jīng)元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯(lián)系,形成小腦皮層內(nèi)的神經(jīng)元環(huán)路,,在小腦的神經(jīng)活動(dòng)中起著非常重要的作用,。在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病中,病變可波及小腦顆粒神經(jīng)元,,導(dǎo)致小腦皮層的神經(jīng)元環(huán)路受損,,從而呈現(xiàn)神經(jīng)性行為失調(diào)。研究小腦顆粒神經(jīng)元在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病病理學(xué)變化中的反應(yīng),、病理發(fā)生的機(jī)理特別是分子機(jī)理,,有賴于小腦顆粒神經(jīng)元細(xì)胞模型的建立。小腦顆粒細(xì)胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維,,正是這種排列保證了興奮的單向傳導(dǎo),,這是小腦功能理論中的關(guān)鍵假設(shè),,小腦顆粒細(xì)胞通過g-氨基丁酸接受戈?duì)柤?xì)胞的抑制性突觸的信息傳入。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腦顆粒細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基,、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腦顆粒細(xì)胞經(jīng)NSE免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml) 培養(yǎng)基含B-27、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R112 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)神經(jīng)元細(xì)胞樣 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞,;屬于不增殖細(xì)胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),, 以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
狗 IL5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
狗 IL1B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
狗 IL1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
狗 IL21 基因全長(zhǎng)ORF克隆
狗 IL6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
狗 IL2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 IL20Ra 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 CD3E 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 LAMP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 KIRREL3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠小腦顆粒細(xì)胞78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Sorting nexin-1
1.56-100 IU/mL 人1(PRM1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人粘蛋白4(MUC4)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 29
腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基 英文名稱:Enterotoxin toxin-producing medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
醇類中和劑管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:9ml*20
0.156-10 ng/mL 人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 前列腺素D2(PGD2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Roundabout homolog 4
萋-尼氏染色液 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*6