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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-13 09:15:41瀏覽次數(shù)：300
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0739 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實驗要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小氣道平滑肌細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0739 |
商品介紹：
名稱 小氣道平滑肌細(xì)胞 2.組織來源：小氣道組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人小氣道平滑肌細(xì)胞分離自小氣道組織,；臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細(xì)支氣管稱為小氣道,。小氣道具有氣流阻力小,，但易阻塞的特點(diǎn)。在平靜吸氣時,，空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部,，產(chǎn)生渦流。由于小氣道已無軟骨支持,，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后,，管腔通暢性不象軟骨性氣道，易于受胸腔的壓力變化的影響,。小氣道上皮細(xì)胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層,，作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著*的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,，這些細(xì)胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng),、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御、表達(dá)粘附分子,，并可能通過HLA-DR表達(dá)呈遞抗原,；它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病,，如哮喘,、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,，都涉及呼吸道表面上皮細(xì)胞的破壞,；小氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴(kuò)增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏,；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。小氣道的生理功能特點(diǎn)：①小氣道阻力小,；②氣流速度慢,；③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例。小氣管平滑肌細(xì)胞主要功能：①保持氣道張力維持小氣道形態(tài),；②肺小氣道進(jìn)行氣體交換，病變可引起換氣功能障礙,；③炎癥,、痰液阻塞或當(dāng)氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時容易造成小氣道閉合、萎陷,。小氣管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化：①支氣管炎,；②肺氣腫；③慢性阻塞性肺疾病,。 5.方法簡介： 實驗室分離的人小氣道平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人小氣道平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H013 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
TRIB2 基因全長ORF克隆
TWF2 基因全長ORF克隆
PDK3 基因全長ORF克隆
STYK1 / NOK 基因全長ORF克隆
Wnt-1 基因全長ORF克隆
RORC 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
sFRP-4 基因全長ORF克隆
CLK3 基因全長ORF克隆
Smad1 基因全長ORF克隆
CDK8 基因全長ORF克隆
小氣道平滑肌細(xì)胞0.78-50 ng/mL 人Disabled同系物2（Disabled homolog 2）ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Neurogranin
6.5%NaCl葡萄糖瓊脂 英文名稱：6.5% NaCl Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 人不典型蛋白C1orf106(Uncharacterized protein C1orf106)ELISA試劑盒
TB培養(yǎng)基 英文名稱：TB Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 人乳腺珠蛋白(Mammaglobin-A) ELISA試劑盒
3.12-200 ng/mL ELISA Kit for Human SPARC
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Heat shock factor protein 4
0.156-10 ng/mL 人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
抗生素檢定培養(yǎng)基2號（低pH） 英文名稱：Antibiotic Agar NO.2 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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