產(chǎn)品屬性:
商品介紹:
名稱 小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 2.組織來源:骨髓 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞分離自骨髓,;骨髓是機(jī)體的造血組織,,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能紅細(xì)胞,、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,,包括細(xì)菌,、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能抗體,。因此,,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,,稱為紅骨髓。出生時(shí),,紅骨髓充滿全身骨髓腔,,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,,亦稱為成血管細(xì)胞(Angioblast),,是一群具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù),。研究顯示,,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病,、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn),。 5.方法簡介: 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞采用沖洗骨髓,、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測: 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%) 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M140 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代,;不建議多次傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),, 以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,易碎,,取放蓋玻片時(shí)動作要輕,;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H1N1 (A/Brevig Mission/1/1918) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/2003) Matrix protein 1 / M1 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) Matrix protein 1 / M1 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) Matrix protein 1 / M1 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) Matrix protein 1 / M1 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) Matrix protein 1 / M1 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) Matrix protein 1 / M1 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) Matrix protein 1 / M1 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人α-生育轉(zhuǎn)移蛋白(Alpha-TTP)ELISA試劑盒
產(chǎn)芽孢肉湯 英文名稱:Sporulation Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Complement C4-B
78-5000 pg/mL 人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒
3.12-200 U/mL ELISA Kit for Human Mucin-16
15.6-1000 U/mL ELISA Kit for Human Melanocyte antibody
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Oxysterols receptor LXR-beta
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Early activation antigen CD69
7.8-500 ng/mL 人β胡蘿卜素雙脫氧2(BCDO2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 白受體FcRn的大亞基p51(FcRn)ELISA試劑盒