化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠腸巨噬細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0871 |
商品介紹：
名稱 大鼠腸巨噬細(xì)胞 2.組織來源：腸組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠腸巨噬細(xì)胞分離自腸道組織,；腸道指的是從胃幽門至的消化管,。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段,。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘渣,，形成糞便，再通過直腸經(jīng)排出體外,。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分,，其實它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng),。巨噬細(xì)胞屬于免疫細(xì)胞，有多種功能,，是研究細(xì)胞吞噬,、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,，有多種功能,，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象,。巨噬細(xì)胞較易獲得,，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化,。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng),，難以長期生存,。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞,，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞,。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫),。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對病原體作出反應(yīng),。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠腸巨噬細(xì)胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠腸巨噬細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R048 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)巨噬細(xì)胞樣 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群 消化液（12mM） 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 CLEC12A 基因全長ORF克隆
小鼠 CD63 基因全長ORF克隆
小鼠 FAM19A5 基因全長ORF克隆
小鼠 FAM19A4 基因全長ORF克隆
小鼠 FAM19A2 基因全長ORF克隆
小鼠 CLMP / ASAM 基因全長ORF克隆
小鼠 PRDX1 基因全長ORF克隆
小鼠 PRDX5 基因全長ORF克隆
小鼠 UMOD 基因全長ORF克隆
小鼠 CRKL 基因全長ORF克隆
大鼠腸巨噬細(xì)胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Platelet glycoprotein VI
改良綠色酵母菌和真菌肉湯 英文名稱：m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.78-50 ng/mL 人轉(zhuǎn)膠蛋白2(TAGLN2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人碘甲腺原脫碘Ⅱ(DIO2)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL 人結(jié)合蛋白1(CABIN1)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 人防御素β103A(DEFβ103A)ELISA試劑盒
無菌采樣袋（45cm*55cm） 英文名稱：Sterile Homogeneous Bag 產(chǎn)品規(guī)格：50個/包
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human 1-phosphatidylinositol-4, 5-bisphosphate phosphodiesterase beta-1
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Dimethylglycine dehydrogenase, mitochondrial
0.156-10 ng/mL 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
化工儀器網(wǎng)