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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-22 08:50:12瀏覽次數(shù)：255
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1071 | 應用領域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1071 |
商品介紹：
名稱 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 2.組織來源：視網(wǎng)膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞分離自視網(wǎng)膜組織,；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞,、遮光,、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層,、視錐,、視桿細胞層,、外界膜,、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層,、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用,；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成,。第一神經(jīng)元是視細胞層,，專司感光,，它包括錐細胞和桿細胞,。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處最多,。第二層叫雙節(jié)細胞,，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用,。第三層叫節(jié)細胞層,，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結(jié)構(gòu),，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū)，其分辨能力*,。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞貼壁后呈單層排列,，部分細胞聚集成團，細胞呈圓形或橢圓形,，核圓且相對透明,，有些細胞膜上伸出短而小的突起；該細胞為高度分化細胞,，在體外屬于不增殖群,。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞是青光眼病理性損害的主要細胞,，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷，研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發(fā)病機制的研究,。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法,，結(jié)合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含B-27 Supplement,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M122 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)神經(jīng)元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
TNFSF13 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
AREG 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
GDF2 / BMP-9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
AGTR-2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
ADRB2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
AGTR1 / AT1 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
SHH / Sonic Hedgehog 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
ITGA6 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
Galectin-8 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
PCSK1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞LAMVAB瓊脂 英文名稱：LAMVAB Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
15.6-1000 pg/mL 細小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Ovostatin homolog 1
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基（FT） 英文名稱：Thiolglycollate Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 人脂閥結(jié)構(gòu)蛋白-1(Flotillin-1) ELISA試劑盒
改良麥康凱肉湯（CT-MAC） 英文名稱：Modified MacConkey Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Fractalkine
XLD培養(yǎng)基平板（9cm） 英文名稱：Xylose Lysine Desoxycholate Medium 產(chǎn)品規(guī)格：10個/包
含青TSA培養(yǎng)基平板（7cm） 英文名稱：Tryptose Soya Agar 產(chǎn)品規(guī)格：10個/包
0.156-10 ng/mL 人心肌營養(yǎng)素1(CT1)ELISA試劑盒
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