產(chǎn)品屬性:
商品介紹:
名稱(chēng) 小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞 2.組織來(lái)源:腦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦皮層組織,;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,,它是神經(jīng)元胞體集中的地方,。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3),、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,,溝或裂之間的隆起叫回,,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂,、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,,使大腦皮質(zhì)組分為額葉,、頂葉,、顳葉、枕葉四大部分,。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),,在銀浸染標(biāo)本中,少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小,,其突起也較小而少,,呈珠狀,故被稱(chēng)為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞,。但是用特異性免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示的少突膠質(zhì)細(xì)胞,,其突起并不少,而且還有許多分支,。少突膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中包繞軸突,、形成絕緣的髓鞘結(jié)構(gòu)、協(xié)助生物電信號(hào)的跳躍式高效傳遞并維持和保護(hù)神經(jīng)元的正常功能,。其異常不僅會(huì)導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變,,還會(huì)引起神經(jīng)元損傷或精神類(lèi)疾病,甚至可以引發(fā)腦腫瘤,。根據(jù)少突膠質(zhì)細(xì)胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質(zhì)細(xì)胞(interfasicular-oligodendrocyte),,分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的白質(zhì)的神經(jīng)纖維束之間;②神經(jīng)細(xì)胞周少突膠質(zhì)細(xì)胞(perineuronal-oligodendrocyte),,分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)區(qū),,常位于神經(jīng)細(xì)胞周?chē)c神經(jīng)細(xì)胞的關(guān)系密切,,故又稱(chēng)為神經(jīng)細(xì)胞周衛(wèi)星細(xì)胞(perineuronal-satellite-cell),,但在神經(jīng)細(xì)胞胞體與此類(lèi)細(xì)胞之間亦常有星形膠質(zhì)細(xì)胞的薄片狀突起分隔;③血管周少突膠質(zhì)細(xì)胞(pcrivascular-oligodendrocyte),,主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管周?chē)?。少突膠質(zhì)細(xì)胞形成的髓鞘膜是最為特化和復(fù)雜動(dòng)物細(xì)胞膜之一,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結(jié)構(gòu),。如半乳糖腦苷脂(GC),,它是髓鞘的一種主要類(lèi)脂,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞是一種比較早的免疫鑒定方法,。近十年來(lái),,神經(jīng)發(fā)育學(xué)科進(jìn)展較快,更多的少突膠質(zhì)細(xì)胞分子標(biāo)記物被鑒定出來(lái),,如PDGFRa,、Mbp、CNP、SOX-10,。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞采用胰蛋白酶消化,、混合細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過(guò)專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含B-27 Supplement、PDGF-AA,、bFGF,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M186 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性不增殖,;不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),, 以防止冰晶過(guò)大,,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照,。
食蟹猴 CD2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 PKM2 / OIP3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
GKN1 / Gastrokine 1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CECR1 / ADA2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
FSTL5 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞腦特異性磷脂酸樣蛋白1抗體Human PARVG ELISA Kit2-異丁酸
跨膜蛋白TMEM176B抗體Human PARVA ELISA KitDL-2-丁酸
富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白2抗體Human PARVB ELISA Kit
富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白4抗體Human PBK ELISA Kit聚乙二醇1500
LZIC蛋白抗體Human PBX1 ELISA Kit無(wú)水碳酸鈉
Lgi3蛋白抗體Human PARVA ELISA Kit原兒茶醛
Lhx4蛋白抗體Human PBX3 ELISA Kit二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SCDO3抗體Human PINP(N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit甜葉菊