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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-19 14:05:13瀏覽次數(shù)：316
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0951 | 應用領域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠心肌成纖維細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0951 |
商品介紹：
名稱 大鼠心肌成纖維細胞 2.組織來源：心臟組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠心肌成纖維細胞分離自心臟組織,；心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成，非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%,，其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁*,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻,，散在生長,，不聚集成團；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。近年來，人們逐漸了解到非心肌細胞不僅對心肌細胞具有結構上的支持,、保護作用,，而且還具有自分泌和旁分泌功能,，影響心肌細胞的結構和生理功能；心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質(zhì)外的合成,，當心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子,。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中最常見的細胞，可合成和分泌膠原纖維,、彈性纖維,、網(wǎng)狀纖維及有機基質(zhì)，并且在外傷等因素刺激下,，部分纖維細胞可重新轉變?yōu)橛字傻某衫w維細胞,，其功能活動也得以恢復，參與組織損傷后的修復,。因此,，對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現(xiàn)代心血管領域研究的一個重點。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠心肌成纖維細胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠心肌成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R074 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 ST6GAL1 基因全長ORF克隆
大鼠 EPHX1 基因全長ORF克隆
大鼠 HSPB8 基因全長ORF克隆
大鼠 ADA 基因全長ORF克隆
大鼠 PDIA3 基因全長ORF克隆
大鼠 CALM1 基因全長ORF克隆
大鼠 PROSC 基因全長ORF克隆
大鼠 BLMH 基因全長ORF克隆
大鼠 RBBP7 基因全長ORF克隆
大鼠 LOC299282 基因全長ORF克隆
大鼠心肌成纖維細胞7.8-500 pg/mL 人干擾素α-8(IFN-alpha-8)ELISA試劑盒
改良醇麥康凱瓊脂添加劑 英文名稱：Modified Sorbitol MacConkey Agar Additives 產(chǎn)品規(guī)格：1ml*5支
7.8-500 ng/mL ELISA Kit for Human Ischemia Modified Albumin
0.156-10 ng/mL 人黑色素聚集激素受體2(MCHR2)ELISA試劑盒
312-20000 pg/mL 人皮卡丘素(Pikachurin)ELISA試劑盒
0.125-8 ng/mL 人鞘氨醇1酯受體4(S1PR4)ELISA試劑盒
含1%棉籽糖的PY培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：1ml*20支
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Mesenteric estrogen-dependent adipogenesis protein
7.8-500 ng/mL 人糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人谷氨酰肽環(huán)轉移(QPCT)ELISA試劑盒
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