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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2025-02-26 16:57:37瀏覽次數(shù)：344
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0391 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| NCI-H209 [H209] (小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0391 |
商品介紹：
名稱 NCI-H209 [H209] (小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 別稱H209; H-209; NCIH209 種屬人類 年齡（性別）55歲 組織來源肺,；源自轉(zhuǎn)移部位：骨髓 生長特性懸浮細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)圓形細(xì)胞，聚團(tuán)生長 背景描述NCI-H209細(xì)胞由Gazdar·A·F及其同事于1979年從一名小細(xì)胞肺癌患者的骨髓轉(zhuǎn)移灶中分離建立,，該骨髓標(biāo)本的獲取先于患者的治療,。NCI-H209細(xì)胞是一種典型的小細(xì)胞性肺癌細(xì)胞，表達(dá)較高水平的4種生化標(biāo)志：神經(jīng)特異性烯醇,、肌酸激酶腦型同工酶,、左旋多巴脫羧酶、鈴蟾肽樣免疫活性,。c-myc DNA序列沒有擴(kuò)增,；未發(fā)現(xiàn)大的結(jié)構(gòu)DNA的異常；NCI-H209細(xì)胞合成與正常肺相當(dāng)量的p53 mRNA,。NCI-H209細(xì)胞以聚集體的形式懸浮生長,，只有聚集體中的細(xì)胞是有活力的，但是細(xì)胞活率無法估計,，一般培養(yǎng)基中含有大量的細(xì)胞碎片,。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例5×10^5-1×10^6cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~50-70小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, forms transplantable tumors with typical SCLC histology in nude mice. 注意事項該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,，請注意離心收集細(xì)胞懸液；請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液,。 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
FBL 基因全長ORF克隆
TMOD1 基因全長ORF克隆
SORD 基因全長ORF克隆
FIBP 基因全長ORF克隆
TMOD3 基因全長ORF克隆
CALHM3 基因全長ORF克隆
GPD1 基因全長ORF克隆
TBCC 基因全長ORF克隆
GMPR 基因全長ORF克隆
IK 基因全長ORF克隆
NCI-H209 [H209] (小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 1000 U 限制性內(nèi)切KpnI Restriction Endonuclease -20℃保存
1mL Protease Inhibitors Cocktail for General Use Protease Inhibitors Cocktail for General Use 常溫保存
1mL 衣溶液,5mg/mL Tunicamycin Solution 4℃避光保存
2 ug pTagCFP-N pTagCFP-N 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存
UVM1添加劑 UVM Supplement1 1ml*5支
1瓶 97-L細(xì)胞株 97-L 低溫運(yùn)輸和保存
1000支 200 μL RNase-free 黃吸頭（袋裝） 常溫
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