 |
上海谷研實業(yè)有限公司 |
|
—— 銷售熱線 ——
18321818584 |
| 參考價 | 面議 |
更新時間：2025-02-26 16:39:07瀏覽次數(shù)：333
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0123 | 應用領域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| IMR-32 (神經(jīng)母細胞瘤細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0123 |
商品介紹：
名稱 IMR-32 (神經(jīng)母細胞瘤細胞) 別稱IMR 32; IMR32; Institute for Medical Research-32; GM03320 年齡（性別）男 組織來源神經(jīng)母細胞瘤,，大腦 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 背景描述IMR-32細胞是由W·W·Nichols、J·Lee和S·Dwight于1967年4月從一位13個月大的男嬰下腹部腫瘤中分離建系,。診斷認為是神經(jīng)母細胞瘤,，并有少部分區(qū)域的器質(zhì)性分化。IMR-32細胞包括兩種類型的細胞：主要的是小的神經(jīng)母細胞樣的細胞,；另一種是大的透明成纖維樣細胞,。IMR-32細胞提交到ATCC時已經(jīng)傳到第36代,，已經(jīng)證明細胞可以傳代培養(yǎng)到80代以上。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~20-50 hours 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5% 溫度：37℃ |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠白介素17(IL-17)免疫試劑盒*直銷
雞新城疫病毒(NDV)抗體免疫試劑盒進口,、組裝
抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)免疫試劑盒*直銷
膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)抗體(IgG)免疫試劑盒進口,、組裝
犬α-3干擾素(IFN-α3)免疫試劑盒*直銷
兔子8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)免疫試劑盒*直銷
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒進口、組裝
豬端粒(TE)免疫試劑盒*直銷
D-乳酸免疫試劑盒進口,、分裝
α-烯醇化(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)免疫試劑盒進口,、組裝
IMR-32 (神經(jīng)母細胞瘤細胞)125mL RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液），pH8.0 RNase-Free TE Buffer,，pH8.0 常溫保存
1瓶 2V6.11細胞株 2V6.11 低溫運輸和保存
2 ug pRNATin-H1.2/Hygro pRNATin-H1.2/Hygro 低溫運輸,，-20℃保存
50次 血液RNAout Blood RNAOUT 4℃保存
2 ug pcDNA3-YFP pcDNA3-YFP 低溫運輸，-20℃保存
面包酵母標準培養(yǎng)基 250g
25mL 四甲基乙二胺 N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine(TEMED) 4℃避光保存
化工儀器網(wǎng)
化工儀器網(wǎng)