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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-18 16:41:42瀏覽次數(shù)：300
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0915 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0915 |
商品介紹：
名稱 大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來(lái)源：腎組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),，如葡萄糖、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、碳酸氫鈉等,，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡,。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素,、活性素D3,、前列腺素,、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎動(dòng)脈的分支為葉間動(dòng)脈,，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,，形成與腎表面平行的弓狀動(dòng)脈,。小葉間動(dòng)脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動(dòng)脈,，進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng),，再匯集成出球小動(dòng)脈，出腎小體,。直小動(dòng)脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈,，入弓狀靜脈,、葉間靜脈，最后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,，注入下腔靜脈,。腎動(dòng)脈既是腎的營(yíng)養(yǎng)血管，又是腎的機(jī)能血管,，與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān),。腎動(dòng)脈在腎實(shí)質(zhì)內(nèi)形成兩個(gè)毛細(xì)血管網(wǎng)：腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較高,，利于血漿濾過(guò)形成原尿,；球后毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較低,，利于腎小管的重吸,。腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是腎動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,。腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有：①在血漿濾過(guò)形成原尿的過(guò)程中起重要作用,，②在腎小管的重吸收過(guò)程中起重要作用，③保持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R060 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 HPX 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 PILRA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 Serpinb8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 IFNAR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 THY1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 OMD 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TNFRSF10B / TRAILR2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 THSD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TIMP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 ELANE / ELA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞0.312-20 ng/mL 人二甲基-二甲胺水解(DDAH2)ELISA試劑盒
0.39-25 ng/mL 前列腺素F2alpha (Prostaglandin F2alpha)ELISA試劑盒
含青接觸皿培養(yǎng)基平板（5.5cm） 英文名稱：Contact Plate Medium 產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)/包
31.2-2000 pg/mL 轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測(cè)試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Calcineurin-binding protein cabin-1
新生（125ug/支） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：125ug/支*5
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Basigin
78-5000 pg/mL 人鞘氨醇1酯受體5(S1PR5)ELISA試劑盒
7.8-500 pg/mL 人polo樣蛋白激1(PLK1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 新型甲型H1N1流感病毒(IAV-H1N1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
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