化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| MIN6（小鼠胰島瘤細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0657 |
商品介紹：
名稱 MIN6（小鼠胰島瘤細(xì)胞) 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋0.05mM β-mercaptoethanol＋1% P/S 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
AIM2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FOXP3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CLEC2D 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IDO1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
JAG1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CTHRC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ADM 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FPR3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SSTR2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PAEP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MIN6（小鼠胰島瘤細(xì)胞)0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Stabilin-1
0.156-10 ng/mL 人DNA結(jié)合蛋白Ikaros(IKZF1)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Insulin-like growth factor-binding protein 6
0.312-20 ng/mL 人睪丸蛋白聚糖2(Testican-2)ELISA試劑盒
FB2添加劑 英文名稱：FB2 Supplement 產(chǎn)品規(guī)格：2ml*20支
3%氯化鈉三糖鐵(TSI)瓊脂 英文名稱：3%TSI Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Platelet glycoprotein IX
0.625-40 ng/mL 人載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒
1%吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：1%Tween80-Corn Meat Agar Mediun 產(chǎn)品規(guī)格：250g
金氏B培養(yǎng)基管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5ml*20支
化工儀器網(wǎng)