化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 神經(jīng)小膠質(zhì)細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1073 |
商品介紹：
名稱 神經(jīng)小膠質(zhì)細胞 2.組織來源：腦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球,，大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,，它是神經(jīng)元胞體集中的地方,。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。每一個半球都有三個面,，即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3),、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積),；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回,，它們大大增加了大腦的表面積,；大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔,，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉,、顳葉,、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細胞是神經(jīng)膠質(zhì)細胞的一種,，相當于腦和脊髓中的巨噬細胞,，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防線。小膠質(zhì)細胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細胞的20%,，小膠質(zhì)細胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng),，斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和理學研究表明激活的小膠質(zhì)細胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用,，如帕金森病,、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細胞會引起神經(jīng)毒性,。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源,，如腫瘤壞死因子(TNF)，一氧化氮,，白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì),。神經(jīng)小膠質(zhì)細胞的主要功能：①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中；②當程序性細胞死亡時,，或在大腦發(fā)育的過程中,，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細胞,；③膠質(zhì)細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原,，能進行Fc介導的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原,。 5.方法簡介： 實驗室分離的人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法,，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細胞制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H123 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性屬于終末分化細胞,；屬于不增殖細胞群 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達載體), 帶FLAG標簽
甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達載體), 帶FLAG標簽
甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達載體), 帶FLAG標簽
甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達載體), 帶FLAG標簽
甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達載體), 帶FLAG標簽
ApoE 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
S100A1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
vimentin 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
PCSK1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
大鼠 SLC3A2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
神經(jīng)小膠質(zhì)細胞ITC肉湯添加劑 英文名稱：ITC Broth Additive 產(chǎn)品規(guī)格：1ml*5
0.156-10 ng/mL 人鈣粘蛋白5 (Cadherin-5) ELISA試劑盒
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬古,(mLST-Vm)顆粒 英文名稱：Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- Vancomycin 產(chǎn)品規(guī)格：300ml/袋*10
0.156-10 ng/mL 白G(IgG)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA試劑盒
TMP瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：TMP Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
含糖牛肉湯培養(yǎng)基 英文名稱：Beef Broth Medium(with Sugar) 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.625-40 ng/mL 人多聚二腺苷核糖聚合1(PARP-1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激結(jié)合蛋白3(TAB3)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人粘蛋白15(MUC15)ELISA試劑盒
化工儀器網(wǎng)