詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小氣道上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0725 |
商品介紹:
名稱 小氣道上皮細胞 2.組織來源:小氣道組織 3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 人小氣道上皮細胞分離自小氣道;臨床上通常將內徑小于2mm的小細支氣管稱為小氣道,。小氣道具有氣流阻力小,,但易阻塞的特點。在平靜吸氣時,空氣進入狹窄的鼻咽部,,產生渦流。由于小氣道已無軟骨支持,,在脫離纖維鞘嵌入肺組織后,,管腔通暢性不象軟骨性氣道,,易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細胞形成連續(xù)呼吸道內層,,作為隔絕外界有害物質的物理和功能屏障發(fā)揮著*的作用,。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,這些細胞在功能上能夠調節(jié)免疫反應,、產生化學因子進行宿主防御,、表達粘附分子,并可能通過HLA-DR表達呈遞抗原,;它們還能產生液體有助于肺液的平衡,。許多呼吸道疾病,如哮喘,、支氣管炎,、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,都涉及呼吸道表面上皮細胞的破壞,;小氣道上皮細胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇,。小氣道的生理功能特點:①小氣道阻力小,;②氣流速度慢,;③可調節(jié)控制通氣與血流比例。 5.方法簡介: 實驗室分離的人小氣道上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的人小氣道上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產品貨號CM-H010 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,,造成細胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
CCNB2 基因全長ORF克隆
TIGIT / VSTM3 基因全長ORF克隆
CCNH 基因全長ORF克隆
CDH16 基因全長ORF克隆
CCNC 基因全長ORF克隆
OSTM1 基因全長ORF克隆
HIST2H4A 基因全長ORF克隆
FGF21 基因全長ORF克隆
CCNB1 基因全長ORF克隆
TDGF1 基因全長ORF克隆
小氣道上皮細胞1.25-80 ng/mL ELISA Kit for Human Involucrin
15.6-1000 pg/mL 登革熱病毒Ⅰ型(DFV-Ⅰ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
牛津瓊脂(OXA)平板(9cm) 英文名稱:Oxford Agar Base 產品規(guī)格:10個/包
C.L.E.D培養(yǎng)基 英文名稱:C.L.E.D Medium 產品規(guī)格:250g
0.78-50 ng/mL 腸道腺病毒(EADV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.625-40 ng/mL 人脯氨酰4羥化亞基α1(4-PH alpha-1)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL 人?;被後尫?AARE)ELISA試劑盒
TM培養(yǎng)基 英文名稱:Thayer Martin Agar 產品規(guī)格:250g
抗生素檢定培養(yǎng)基5號 英文名稱:Antibiotic No.5(PH8.0) 產品規(guī)格:250g
Campy-Cefex添加劑 英文名稱:Campy-Cefex Supplement 產品規(guī)格:2ml*5