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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-08 17:00:54瀏覽次數(shù)：237
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0615 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| SW948 (結(jié)腸腺癌細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0615 |
商品介紹：
名稱 SW948 (結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 別稱SW-948; SW 948 種屬人類 年齡（性別）女性，81歲 組織來(lái)源結(jié)腸 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述Established from the colon tumor of a 81-year-old Caucasian woman with colon adenocarcinoma (Duke C) 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1%P/S 推薦傳代比例1:2-1:5 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~120小時(shí),(PubMed=1000501); 2-4天 (DSMZ) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，100% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 107 cells. 基因表達(dá)情況carcinoembryonic antigen (CEA) 7 ng/106 cells/10 days; colon specific antigen (CSAp) 750 units in 0.5 mL cell sonicate; keratin 注意事項(xiàng)1,、該細(xì)胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,，會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性,； 2、如您沒(méi)有無(wú)二氧化碳的培養(yǎng)箱,，可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,，使用DMEM培養(yǎng)基時(shí)即可正常通入5%二氧化碳； 2,、配套專用培養(yǎng)基默認(rèn)Leibovitz's L-15配置,，如需DMEM配方，請(qǐng)聯(lián)系銷售下單備注更改,。 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
PDK2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ADRBK2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PKD1L2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MICA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CHST4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FUT9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BDKRB1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRKACG 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ISL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ANGPTL7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SW948 (結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基（不含瓊脂） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Signal transducer and activator of transcription 5A
15.6-1000 ng/mL ELISA Kit for Human Interferon alpha-10
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ezrin
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Dipeptidyl peptidase 4
YM培養(yǎng)基 英文名稱：YM Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
7.8-500 pg/mL 人肥大細(xì)胞羧肽3(CPA3)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白(Dystrophin)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人帕金協(xié)同調(diào)節(jié)基因蛋白ELISA試劑盒
抗生素5號(hào) 英文名稱：Antibiotic NO.5 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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