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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0875 |
商品介紹：
名稱 大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞 2.組織來源：子宮組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官,，位于盆腔中部,，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,，由上皮（屬單層柱狀上皮,，有分泌細胞和纖毛細胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細胞，稱為基質(zhì)細胞）組成,，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5,；基底層較薄較致密,，約占1/5，功能層可剝脫,，而基底層不可剝脫,。子宮內(nèi)膜上皮細胞主要功能：①子宮內(nèi)膜亦稱子宮黏膜，是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層,；②子宮內(nèi)膜對動情素和孕激素都起反應,，因此可隨著性周期（發(fā)情周期、月經(jīng)周期）發(fā)生顯著的變化,。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān)，在生殖生理的研究中占重要地位,。在胚胎與母體“對話"的過程中,，子宮內(nèi)膜上皮細胞充當了極其重要的角色。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的最內(nèi)層,，位于子宮腔面,，在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,，子宮內(nèi)膜的再生修復是子宮的重要生理功能,。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞采用先膠原酶消化,、后組織貼塊法，結(jié)合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R049 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 FGF5 基因全長ORF克隆
小鼠 NTN3 基因全長ORF克隆
小鼠 CD19 基因全長ORF克隆
小鼠 Neuropilin-1 基因全長ORF克隆
小鼠 BMP3 基因全長ORF克隆
小鼠 IL20RB 基因全長ORF克隆
小鼠 BMPER 基因全長ORF克隆
小鼠 RLN3 基因全長ORF克隆
小鼠 LY9 基因全長ORF克隆
小鼠 CD282 / TLR2 基因全長ORF克隆
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞31.2-2000 pg/mL 人肌醇單1(IMPA1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Calreticulin
0.78-50 ng/mL 小鼠神經(jīng)細胞神經(jīng)營養(yǎng)因子(Protein NDNF)ELISA試劑盒
1%NaCl纖維二糖 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Phosphatidylinositol 3, 4, 5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 2 protein
M-肉湯 英文名稱：M-Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
31.2-2000 pg/mL 人鈣粘素13(Cadherin-13)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 轉(zhuǎn)基因植物NPTⅡ基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Platelet glycoprotein 4
0.156-10 ng/mL 破傷風芽孢梭菌(CT)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
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