詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠胃平滑肌細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1367 |
商品介紹:
名稱 小鼠胃平滑肌細胞 2.組織來源:胃組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠胃平滑肌細胞分離自胃組織,;胃柔軟,活體呈橘紅色,。胃空虛時形成許多皺襞,,充盈時變平坦。胃壁由粘膜,、粘膜下膜,、肌膜和漿膜四層構(gòu)成。粘膜上皮為柱狀上皮,。上皮向粘膜深部下陷構(gòu)成大量腺體(胃底腺,、賁門腺、幽門腺),,它們的分泌物混合形成胃液,,對食物進行化學性消化。粘膜在幽門處由于覆蓋幽門括約肌的表面而形成環(huán)狀的皺襞叫幽門瓣,。胃肌膜由三層平滑肌構(gòu)成,,外層縱形,中層環(huán)形,,內(nèi)層斜行,,其中環(huán)形肌,在幽門處特別增厚形成幽門括約肌,。胃平滑肌細胞源自胃的平滑肌層,,細胞通過緊密連接,進行同步性運動,,完成肌肉的舒縮活動,,以推動食物前進,完成對食物的機械性消化,,并促進化學性消化和吸收,。胃平滑肌具有肌組織的共同特性,如興奮,、自律性,、傳導性和收縮性,在離體后,,置于適宜的環(huán)境內(nèi),,仍能進行良好的節(jié)律性運動,但其收縮很緩慢,,節(jié)律性遠不如心肌規(guī)則,。胃平滑肌對電刺激較不敏感,,但對于牽張、溫度和化學刺激則特別敏感,,輕微的刺激??梢饛娏业氖湛s。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環(huán)境分不開的,,胃內(nèi)容物對平滑肌的牽張,、溫度和化學刺激是引起內(nèi)容物推進或排空的自然刺激因素。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠胃平滑肌細胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測: 實驗室分離的小鼠胃平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M237 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%;CO2,,5% |
冷凍保存細胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,,造成細胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,,取放蓋玻片時動作要輕,;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD68 / Macrosialin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD47 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 REG1A / PSPS 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 SCARB3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IL20RB 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠胃平滑肌細胞內(nèi)皮受體蛋白激抗體Human INSM1(Insulinoma-associated protein 1) ELISA Kit氧化鋁H
蛋白激受體B2抗體Human HMGCS2 (Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, mitochondrial) ELISA KIT1,,4-雙(5-苯基-2-惡唑)苯
化雌受體ER alpha 抗體Human INSM2 (Insulinoma-associated protein 2) ELISA KIT氟化鈰
重組增強型綠色熒光蛋白抗體Human HEMK1 (HemK methyltransferase family member 1) ELISA KIT人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒,
雌受體α抗體(用于western blot)Human HRAS(GTPase HRas) ELISA Kit人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒,
雌受體α/β抗體Human HSD17B1(Estradiol 17-beta-dehydrogenase 1) ELISA Kit人綠膿桿外素A(PEA)ELISA試劑盒,PEA ELISA KIT
自分泌運動因子抗體Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) ELISA Kit人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒,LTC4 ELISA
蛋白激A3受體抗體Human UGT1A1(UDP-glucuronosyltransferase 1-1) ELISA Kit小鼠糖原化同工II(GP-II)ELISA試劑盒,