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詳細(xì)介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 骨髓單個核細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1369 |
商品介紹：
名稱 骨髓單個核細(xì)胞 2.組織來源：骨髓 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人骨髓單個核細(xì)胞分離自骨髓,；骨髓是機(jī)體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用,，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌,、病毒等,；某些淋巴細(xì)胞能抗體。因此,，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓,。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大,，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓單個核細(xì)胞是骨髓中具有單個核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞,。注意這里是（mononuclear cell）單個核細(xì)胞,，而不是（Monocyte）單核細(xì)胞。單個核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同,，利用一定比例聚蔗糖和泛影酸鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,，使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，可將各種血細(xì)胞與單個核細(xì)胞分離,。 5.方法簡介： 實驗室分離的人骨髓單個核細(xì)胞采用取骨髓,、通過密度梯度離心法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人骨髓單個核細(xì)胞經(jīng)檢測,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H238 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性半貼壁半懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖,；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 CD3d / CD3 delta 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IFN omega 1 / IFNW1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD27 / TNFRSF7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 LILRA5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 HepaCAM2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 TNFSF15 / TL1A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 FcERI / FCER1A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SLITRK6 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
骨髓單個核細(xì)胞Saccharomyces cerevisiaeMutY同源物檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae解整合素金屬蛋白8檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae還原型輔Ⅰ檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae磷脂酰肌檢測試劑盒
Candida parapsilosis蛋白S檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae蛋白C檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiaeCXC趨化因子配體14檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae巨噬集落激因子1受體檢測試劑盒
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