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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-19 14:12:42瀏覽次數(shù)：278
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0955 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 心肌細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0955 |
商品介紹：
名稱 心肌細(xì)胞 2.組織來源：心臟組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人心肌細(xì)胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官,，主要功能是為血液流動提供壓力,，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成,，左心房,、左心室、右心房,、右心室四個腔組成,。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通,，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣）,，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流,。心臟的作用是推動血液流動,，向器官、組織提供充足的血流量,，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽,、尿素和尿酸等）,，使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形,、多邊形等不規(guī)則形狀,；細(xì)胞培養(yǎng)2h后開始貼壁，呈梭形；到12h左右,，細(xì)胞開始伸出偽足,，呈菱形、多角形,；細(xì)胞分離培養(yǎng)48h以后,，大部分伸出偽足、呈巴掌狀,，部分心肌細(xì)胞會出現(xiàn)搏動,；心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，在體外不增殖,。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點,，并具有自發(fā)性節(jié)律搏動，且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡便,、定量,、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),，研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué),、凋亡、受體下調(diào),、缺血預(yù)處理,、信號通路,、對作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對其安全性進(jìn)行評價以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景,，對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。 5.方法簡介： 實驗室分離的人心肌細(xì)胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人心肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H076 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 S100A6 基因全長ORF克隆
大鼠 EMC8 基因全長ORF克隆
大鼠 NDUFS8 基因全長ORF克隆
大鼠 RBP2 基因全長ORF克隆
大鼠 IGFL3 基因全長ORF克隆
大鼠 ZUFSP 基因全長ORF克隆
大鼠 PSMB2 基因全長ORF克隆
大鼠 MYD88 基因全長ORF克隆
大鼠 MRPL36 基因全長ORF克隆
大鼠 IFITM2 基因全長ORF克隆
心肌細(xì)胞78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Oncomodulin-1
15.6-1000 pg/mL 人癌胚抗原細(xì)胞粘附分子(CEACAM1)ELISA試劑盒
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Histone deacetylase 8
霉菌培養(yǎng)基（含瓊脂和氯） 英文名稱：Fungal Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 人受體1(FOLR1)ELISA試劑盒
93.75-6000 pg/mL ELISA Kit for Human Prothrombin
15.6-1000 pg/mL 人促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 人類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人線粒體氧化亞基5 a（Cytochrome c oxidase subunit 5A, mitochondrial）ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人食管特定正常黏膜蛋白1(NMES1)ELISA試劑盒
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