產(chǎn)品屬性:
商品介紹:
名稱 NCI-H1568 [H1568](非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 種屬人類 年齡(性別)女性,48歲 組織來(lái)源未知 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述established in December 1986 from lymph node metastasis of lung 生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:3 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~42.5 小時(shí) 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),, 以防止冰晶過(guò)大,,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
TTK 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PDE4B 轉(zhuǎn)錄變體b 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRKAG1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
METTL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD28 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CSGALNACT2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HDAC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CETN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ENPP5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NCI-H1568 [H1568](非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 31.2-2000 pg/mL 人天門冬氨酰/天冬酰胺酰β羥化(Aspartyl/asparaginyl beta-hydroxylase)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Peroxiredoxin-4
0.312-20 ng/mL 炭疽桿菌(BA)核酸檢測(cè)試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Heat shock protein beta-1
0.156-10 ng/mL 人淋巴細(xì)胞6/尿激型纖溶原激活因子受體結(jié)構(gòu)域蛋白3(LYPD3)ELISA試劑盒
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA) 英文名稱:Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
0.312-20 ng/mL 人清道夫受體B(SRB1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒
3%氯化鈉MR-VP培養(yǎng)基 英文名稱:3% NaCl MR-VP Medium 產(chǎn)品規(guī)格:20支
0.156-10 ng/mL 人腸血管活性肽受體1 ELISA試劑盒