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大鼠骨髓單核細胞

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更新時間:2022-04-22 11:33:04瀏覽次數(shù):240

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1149 應用領域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
大鼠骨髓單核細胞的相關*:動物細胞/組織葡萄糖變位(phosphoglucomutase;PGM)電泳分析試劑盒 5次
植物葡萄糖變位(phosphoglucomutase,;PGM) 5次
電泳分析試劑盒
動物細胞/組織莽草酸脫氫(shikimate dehydrogenase,;SkDH)電泳分析試劑盒 5次
植物莽草酸脫氫(shikimate dehydrogenase;SkDH

詳細介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠骨髓單核細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1149

商品介紹:

名稱    大鼠骨髓單核細胞 

2.組織來源:骨髓

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

大鼠骨髓單核細胞分離自骨髓,;骨髓是機體的造血組織,,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能紅細胞,、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,,包括細菌、病毒等,;某些淋巴細胞能抗體,。因此,骨髓不但是造血器官,,它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,,是一種海綿狀的組織,,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,,稱為紅骨髓。出生時,,紅骨髓充滿全身骨髓腔,,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞,,在骨髓細胞中約占0.04%,,被認為是破骨細胞的前體細胞,較外周血單個核細胞誘導的破骨細胞得率高,、全骨髓誘導法產(chǎn)生的破骨細胞數(shù)量多,,純度高,較脾細胞誘導法分化效率高,。骨髓單核細胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞,,它屬干細胞類型。目前,,大多數(shù)研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞,,最近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠骨髓單核細胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠骨髓單核細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R151

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)巨噬細胞樣

傳代特性不增殖,;不傳代

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,,造成細胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),,懸浮細胞可使用滴片法,;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理,;

3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時動作要輕,;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二,、免疫熒光鑒定:

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;

2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;

5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

 LYPD3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 POFUT2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 FETUB 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 FGF23 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 IL20 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 CD1B 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 IL22 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 IL3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 KLK4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 CASP14 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

大鼠骨髓單核細胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Sorting nexin-9

腦心浸出液肉湯(BHI)顆粒 英文名稱:BHI Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

特殊蛋白胨 英文名稱:Peptone Special 產(chǎn)品規(guī)格:250g

31.2-2000 pg/mL 人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人蛋白激Cγ(PKC-gamma)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人5羥(5-oxoprolinase)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL 大腸桿菌(O157:H7)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

0.156-10 ng/mL 人激肽釋放2(KLK2)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Neuroligin-3

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human 5'-AMP-activated protein kinase subunit beta-1

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