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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1370 |
商品介紹：
名稱(chēng) 小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 2.組織來(lái)源：臍帶組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離自臍帶；臍帶是哺乳類(lèi)的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu),。原來(lái)是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長(zhǎng)部而形成的,。臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈,。當(dāng)卵黃囊及其血管退化,，臍動(dòng)脈和臍靜脈就發(fā)達(dá)起來(lái)，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì),。在子宮中,，子宮動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤(pán)的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒來(lái)的廢物運(yùn)送至胎盤(pán),，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤(pán)運(yùn)送給胎兒,。最后由子宮靜脈將來(lái)自胎兒的代謝廢物運(yùn)走，某種激素和抗體等也通過(guò)臍帶從母體移交給胎兒,。臍帶中含有大量的干細(xì)胞,，干細(xì)胞是生命的種子，它會(huì)分化成機(jī)體的各種細(xì)胞,，結(jié)出各種不同的果實(shí)——血液細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞、骨骼細(xì)胞等,。干細(xì)胞是具有自我更新,、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群體；這些細(xì)胞可以通過(guò)分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量,，又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞,，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞,。在不同的誘導(dǎo)條件下,，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞，并具有造血支持,、免疫調(diào)節(jié),、組織修復(fù)等作用；目前,，多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療,。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞，存在于骨髓,、脂肪組織,、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子，促進(jìn)造血干細(xì)胞（HSC）的增殖與分化,。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié),、抗炎和組織修復(fù)作用，可減輕移植物抗宿主?。?/span>GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞采用組織貼塊法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD29,、CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M238 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照,。
CFHR2 / FHR2 / HFL3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
VASN / Vasorin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
LMAN2L 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
FcERI / FCER1A 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
MFAP5 / MAGP2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
B3GNT2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 SCARB3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 JAM-2 / JAM-B 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 JAM-2 / JAM-B 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞小鼠ⅩAnti-PHF1 Antibody人GTP活化蛋白（GAP）elisa定量檢測(cè)試劑盒
人角蛋白17Anti-PHF3 Antibody人STAT蛋白抑制因子3（PIAS3）elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固受體Anti-PGLS Antibody人心肌鈣黏蛋白（H-Cadherin）elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠黃體生成素釋放Anti-PHAX Antibody人Preptin 蛋白（Preptin）elisa定量檢測(cè)試劑盒
人制瘤素M受體Anti-PHF3 Antibody人β淀粉樣前體蛋白（βAPP）elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子Anti-PHKB Antibody人β甘露糖苷（β Manase）elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠前心鈉肽Anti-PHKA1 Antibody人Hedgehog相互作用蛋白（HHIP）elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠8異前列腺素Anti-PHKG1 Antibody人原鈣黏素γA2（PCDHγA2）elisa定量檢測(cè)試劑盒
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