產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
乳腺癌血管周細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1207 |
商品介紹:
名稱 乳腺癌血管周細(xì)胞 2.組織來(lái)源:乳腺癌組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 人乳腺癌血管周細(xì)胞分離自乳腺癌組織,;女性乳腺是由皮膚、纖維組織,、乳腺腺體和脂肪組成的,,乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發(fā)生在女性,,男性僅占1%,。乳腺并不是維持機(jī)體生命活動(dòng)的重要器官,,原位乳腺癌并不致命;但由于乳腺癌細(xì)胞喪失了正常細(xì)胞的特性,,細(xì)胞之間連接松散,,容易脫落。癌細(xì)胞一旦脫落,,游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身,,形成轉(zhuǎn)移,危及生命,。目前,,乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見(jiàn)腫瘤。周細(xì)胞(pericyte)又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞,,是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞,可以收縮,。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中,,通過(guò)物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過(guò)程,。此外,,周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,,其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一,,所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物,、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料,。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜,,基膜上有多種細(xì)胞連接,,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素,、纖連蛋白以及接合素,。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控;毛細(xì)血管受損時(shí),,周細(xì)胞還可增殖,,分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌血管周細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過(guò)濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌血管周細(xì)胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H173 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%;CO2,,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
KLK3 / Kallikrein 3 ELISA配對(duì)抗體
Cystatin SN / CST1 ELISA配對(duì)抗體
大腸桿 stx2B / Shiga toxin II subunit B ELISA配對(duì)抗體
NGF / NGFB ELISA配對(duì)抗體
XPNPEP2 ELISA配對(duì)抗體
RELT / TNFRSF19L ELISA配對(duì)抗體
小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 ELISA配對(duì)抗體
IL-16 ELISA配對(duì)抗體
ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG ELISA配對(duì)抗體
EphB6 ELISA配對(duì)抗體
乳腺癌血管周細(xì)胞草酸銨 99.99% metals basis1-甲基-2-苯基 99%ANG ELISA Kit 大鼠血管生長(zhǎng)素
鹽酸苯 99%5-甲氧基 99%sEPCR ELISA Kit 大鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體
氟化銨 AR,,98%5-甲酰基水楊酸甲酯 98%KAF/AR ELISA Kit 大鼠角化因子/雙調(diào)蛋白
氟化銨 ≥99.99% metals basis7-硝基 99%cAMP ELISA Kit 大鼠環(huán)腺苷
二氫銨 ≥99.99% metals basis6-硝基 97%ALCAM ELISA Kit 大鼠白活化黏附因子
二氫銨 for HPLC, ≥99.0% (T)4-硝基 98%IL-9 ELISA Kit 大鼠白介素9
偏釩酸銨 AR,,99%2-苯基 99%MIF ELISA Kit 大鼠巨噬移動(dòng)抑制因子
偏釩酸銨 CP,,98%3-喹啉 98%TGF- Alpha ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α