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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0819 |
商品介紹：
名稱 大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來(lái)源：肝動(dòng)脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肝動(dòng)脈組織；在胚胎期,，肝臟有3條動(dòng)脈供血,，分別來(lái)源于胃左動(dòng)脈,、腹腔動(dòng)脈和腸系膜上動(dòng)脈，這3條動(dòng)脈分別的不同部位,。出生后,，一般保留一條動(dòng)脈,，大部分為起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈，由其分出左,、右肝動(dòng)脈供應(yīng)左、右半肝,。偶爾也可見起源于胃左動(dòng)脈的動(dòng)脈或起源于腸系膜上動(dòng)脈的動(dòng)脈,。但也有2條動(dòng)脈并存的情況,，如起源于腹腔動(dòng)脈和起源于胃左動(dòng)脈（25%），起源于腹腔動(dòng)脈和起源于腸系臘上動(dòng)脈（10%）,，而起源于胃左動(dòng)脈和起源于腸系膜上動(dòng)脈的2條動(dòng)脈同時(shí)存在的情況比較少見,。此外,，還有5%像胚胎期一樣，3條動(dòng)脈同時(shí)存在,。這種起源于腹腔動(dòng)脈以外的肝動(dòng)脈稱為迷走肝動(dòng)脈,，如果肝臟沒(méi)有起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈供血時(shí),，此種異位起源的肝動(dòng)脈稱替代動(dòng)脈,，如果在常見肝動(dòng)脈類型外,，還有一支這種異位起始的動(dòng)脈的一部分血流,，這種肝動(dòng)脈稱副肝動(dòng)脈。肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是襯于肝動(dòng)脈內(nèi)表面的單層扁平上皮,，在炎癥時(shí)高表達(dá)黏附分子,，與血流中白細(xì)胞表面黏附分子相互作用,，從而介導(dǎo)白細(xì)胞穿越血管壁，亦屬一類非專職抗原提呈細(xì)胞,。它們吞噬異物、細(xì)菌,、壞死和衰老的組織,，還參與集體免疫活動(dòng)，包括：①血管收縮及血管舒張,，從而控制血壓,；②凝血（血栓形成及纖維蛋白溶解）；③動(dòng)脈硬化,；④血管生成；⑤炎癥及腫脹（浮腫）,；⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì),，如白血球進(jìn)出血管,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R034 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 TSC22D1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 DHRS4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 PGAM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 PSMC6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 PSAP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 HSPA8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TUBB2A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 EIF3L 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 MCM7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 RPL35 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Glia-activating factor
疊氮鈉-七葉苷瓊脂 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Myosin-1
12.5-800 pg/mL 人棕櫚酰化膜蛋白6(MPP6)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 病毒H5N1亞型(AIV-H5N1)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein A-I
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 1
31.2-2000 pg/mL 人脂蛋白脂(LPL)ELISA試劑盒
果蠅培養(yǎng)基 英文名稱：Drosophila medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Netrin-4
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