產(chǎn)品屬性:
商品介紹:
名稱 U-87 MG (腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 別稱U-87MG; U-87 MG; U87 MG; U-87-MG; U87-MG; U87MG; U-87; U87; 87 MG; 87MG 種屬人類 年齡(性別)女性 組織來(lái)源腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述U-87 MG細(xì)胞是由Ponten·J等建立,源于惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤,;U-87 MG細(xì)胞裸鼠皮下接種可成瘤,。 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~36-72小時(shí) 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,,5% 溫度:37℃ 致瘤性Yes, in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. 注意事項(xiàng)該細(xì)胞容易聚團(tuán),,可使用多聚-L-賴氨酸溶液包被后改善,,建議提前配備多聚-L-賴氨酸溶液(貨號(hào) PB180523)。 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),, 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,易碎,,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過(guò)大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)抗體免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝
牛β羥丁酸(βOHB)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝
囊蟲(chóng)病抗體(CYT Ab)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)免疫試劑盒*直銷
山羊轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒*直銷
大鼠凝血原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒*直銷
兔子透明質(zhì)酸(HA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒*直銷
載脂蛋白L1(APOL1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
U-87 MG (腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 500mL Sodium Phosphate Buffer(鈉緩沖液),0.2M,pH8.0 Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存
1 管 SMD1168酵母菌 SMD1168 Yeast Strain -80℃保存
2 ug pSI pSI 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
120mL 氣相RNase清除劑 Air RNase Erasol 常溫
2 ug pCMV6-XL4 pCMV6-XL4 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
DTA培養(yǎng)基 Dextrose Tryptone Agar Medium 250g
250g 聚乙二醇 20000 PEG20000 室溫保存