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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 腸靜脈內(nèi)皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0821 |
商品介紹：
名稱 腸靜脈內(nèi)皮細胞 2.組織來源：腸組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 人腸靜脈內(nèi)皮細胞分離自腸靜脈；腸道指的是從胃幽門至的消化管,。腸是消化管中最長的一段,，也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段,。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的，大腸主要濃縮食物殘渣,，形成糞便,，再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng),。 5.方法簡介： 實驗室分離的人腸靜脈內(nèi)皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人腸靜脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H035 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 IL27 基因全長ORF克隆
小鼠 VDR 基因全長ORF克隆
小鼠 BAZ1B 基因全長ORF克隆
小鼠 LRWD1 基因全長ORF克隆
小鼠 NTRK1 基因全長ORF克隆
小鼠 Lamb1 基因全長ORF克隆
小鼠 Fgf8 基因全長ORF克隆
小鼠 SHH 基因全長ORF克隆
小鼠 EPO 基因全長ORF克隆
小鼠 LY96 / MD-2 基因全長ORF克隆
腸靜脈內(nèi)皮細胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Nesfatin-1
0.39-25 ng/mL 人促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒
強化梭菌鑒別瓊脂（DRCA） 英文名稱：Differentia Reinforced Clostridial Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human E3 ubiquitin-protein ligase TRIM22
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human TGF-beta-activated kinase 1 and MAP3K7-binding protein 1
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Pancreas/duodenum homeobox protein 1
0.625-40 ng/mL 人細胞表面糖蛋白MUC18(Cell surface glycoprotein MUC18) ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human High mobility group protein B4
0.78-50 ng/mL 人肽(PEPD)ELISA試劑盒
脫纖維羊血 英文名稱：Off fiber sheep blood 產(chǎn)品規(guī)格：50ml
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