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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 脈絡膜血管內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0997 |
商品介紹：
名稱 脈絡膜血管內皮細胞 2.組織來源：脈絡膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 人脈絡膜血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織,；脈絡膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,，含有豐富血管和色素細胞,，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差,，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血,。脈絡膜呈暗褐色,，圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū),。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,，由纖維組織、小血管和毛細血管組成,，軟而薄,，棕紅色，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,，續(xù)連于睫狀體后方,。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用,。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體,，并有遮光作用，使反射的物象清楚,。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用,，對整個視覺神經(jīng)有調節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方,，含豐富的血管和色素細胞,，有營養(yǎng)和遮光作用,。 5.方法簡介： 實驗室分離的人脈絡膜血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質量檢測： 實驗室分離的人脈絡膜血管內皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H092 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
狗 CXCL16 基因全長ORF克隆
狗 FGF18 基因全長ORF克隆
狗 CCL25 基因全長ORF克隆
狗 CXCL13 基因全長ORF克隆
狗 CCL26 基因全長ORF克隆
狗 CXCL12 基因全長ORF克隆
狗 GDF9 基因全長ORF克隆
狗 PDGFB 基因全長ORF克隆
狗 PDGFA 基因全長ORF克隆
狗 BMPR1A 基因全長ORF克隆
脈絡膜血管內皮細胞0.156-10 ng/mL 人醛脫氫（Aldehyde oxidase）ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Protein disulfide-isomerase A4
3.12-200 ng/mL ELISA Kit for Human Cell division control protein 42 homolog
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Growth arrest-specific protein 1
15.6-1000 pg/ml 人白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Insulin-degrading enzyme
93.75-6000 pg/mL 人原2(F2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Major vault protein
78-5000 pg/mL 人重復序列包含蛋白2(BIRC2)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Extracellular matrix protein 1
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