PT67 (逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞)的相關(guān)*：細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒 10/50 次
細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 10/50 次
IP3R受體蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
IP3R受體蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
IP3R受體蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 25次
細(xì)胞DHPR受體蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒 10/20次

實(shí)驗要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；

3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性：  

商品介紹：

冷凍保存細(xì)胞之方法,？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。

實(shí)驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；

6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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PT67 (逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞)20次 DNA化試劑盒 DNA Phosphorylation Kit -20℃保存

100mL Kinase Buffer II,5X   Kinase Buffer II,5X   常溫保存

酸水解酪蛋白 Casein acid Hydrolysate 250g

1瓶 SK-N-BE(2)細(xì)胞株 SK-N-BE(2) 低溫運(yùn)輸和保存

腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基(不含瓊脂) Enterotoxin Toxigenic Medium 250g

25g 3,5 二水楊酸 3,5-Dinitrosalicylic Acid 常溫保存

50T 登革熱病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,，-20℃保存