 |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
|
—— 銷售熱線 ——
18321818584 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-22 16:56:47瀏覽次數(shù)：225
聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1323 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1323 |
商品介紹：
名稱 大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 2.組織來源：主動(dòng)脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞分離自主動(dòng)脈血管外膜組織；血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維,。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主,，當(dāng)血管受損傷時(shí),，成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動(dòng)脈中膜和外膜的交界處,，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜,。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的血管外膜成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁*,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻,，散在生長,，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長,，平坦,、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形，顏色淡,。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。血管外膜成纖維細(xì)胞是血管外膜的主要組成細(xì)胞之一,，其主要生理功能合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R219 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳3-5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL1R1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 LAMP2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 REG1A / PSPS 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 XEDAR / EDA2R 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞吡咯 99%聚乙烯縮丁 航空級(jí)Anti-NF-66/a-Internexin/FITC 熒光素標(biāo)記α-中連蛋白抗體IgG
吡咯烷 99%聚乙烯縮丁 M.W.40,000-70,000Anti-NFAM1/CNAIP/FITC 熒光素標(biāo)記NFAM1抗體IgG
葡萄糖 AR聚乙烯縮丁 M.W.90,000-120,000Anti-NFATc1/FITC 熒光素標(biāo)記活化T核因子1蛋白抗體IgG
葡萄糖 CP聚乙烯縮丁 M.W.170,000-250,000Anti-NFBD1/MDC1/FITC 熒光素標(biāo)記DNA損傷關(guān)卡蛋白1抗體IgG
葡萄糖 GR,，99%二硅化鉬 99%Anti-p-NFATc2/FITC 熒光素標(biāo)記化NFATc2抗體IgG
葡萄糖 ACS鋁鎳合金 Ni：47%Anti-NF-H/FITC 熒光素標(biāo)記高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG
葡萄糖 standard for GC, ≥99.5% (GC)氧化鈣 <160 nm particle size (BET), 98%Anti-Phospho-Merlin (Ser518) /FITC 熒光素標(biāo)記化2型神經(jīng)纖維瘤抗體IgG
葡萄糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品氯亞鉑酸銨 鉑含量：52.0%Anti-NF-L/FITC 熒光素標(biāo)記低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG
化工儀器網(wǎng)
化工儀器網(wǎng)