注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù),。需要其他檢測(cè)試劑盒請(qǐng)咨詢銷售人員。
產(chǎn)品全稱:AIM1 黑素瘤缺乏因子1ELISA實(shí)驗(yàn)原理
英文名稱:Absent In Melanoma 1(AIM1)ELISA Kit
貨號(hào):GOY-01E11691
規(guī)格:48T/96T
服務(wù):可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),,以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光,、防潮
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液,、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供,。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一,、高效、靈敏,、特異的抗體;
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三,、吸附性能好,,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五,、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑 1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),,我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證",,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑,。我司的試劑,,值得您選擇。 2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,,以滿足后面的測(cè)定需求。 | 二、樣本 1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子,、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白,、異嗜性抗體,、某些自身抗體等; 類風(fēng)濕因子的控制方法: ①用F(ab)2替代完整的IgG,; ②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理; ③檢測(cè)抗原時(shí),,可用加入到標(biāo)本中使RF降解。 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品),。
3,、樣品(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4,、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6,、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時(shí)每瓶用蒸餾水25倍。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
S100A1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
RENIN 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
RBP4 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
RPSGL-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
Prostasin / Prss8 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
uPA / PLAU 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 PIGR 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
PIGR 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
PD-L2 / B7-DC / CD273 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
PDGFRa / CD140a 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
AIM1 黑素瘤缺乏因子1ELISA實(shí)驗(yàn)原理1,3-二甲基咪唑鎓二甲基酯 98.0%1,6-雙(二苯基膦基)己烷 97%Anti-AARS2 /FITC 熒光素標(biāo)記氨酰tRNA合成2抗體IgG
1-乙基-3-甲基咪唑溴鹽 98%1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵 97%Anti-AAT/FITC 熒光素標(biāo)記α-1抗胰蛋白抗體IgG
1-乙基-3-甲基咪唑六氟鹽 98%雙(三苯基膦)氯化銨 96%Anti-AATF/FITC 熒光素標(biāo)記拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG
1-乙基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞鹽 97%1,4-雙(二苯膦基)丁烷 96%Anti-AATK/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡關(guān)聯(lián)激抗體IgG
1-乙基-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽 98%(R)-(+)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%Anti-BTK/ATK /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠蛋白激ATK抗體IgG
1-乙基-3-甲基咪唑鎓四氟酸鹽 97%R-1,1'-聯(lián)-2-萘酚 99%Anti-Phospho-Btk(Tyr223) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠蛋白激ATK抗體IgG
1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓[用于熔鹽] 98.0%(S)-(-)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%Anti-Phospho-Btk(Ser180) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠蛋白激ATK抗體IgG
1-乙基-3-甲基咪唑乙酯 99%1,3-雙(二苯膦基)烷 97%Anti-ABCA1/FITC 熒光素標(biāo)記腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體IgG
操作步驟:
1,、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,,室溫復(fù)溫平衡30分鐘,。
2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,,記錄各孔位置,,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本40μL(即樣本5倍),;空白對(duì)照孔不加。
4,、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
5,、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。
6,、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,,空白對(duì)照孔不加,。
7,、溫育:重復(fù)4的操作,。
8,、洗板:重復(fù)5的操作。
9,、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min,。
10、終止:取出酶標(biāo)板,,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11,、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),,用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。
12,、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算,。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以倍數(shù)。