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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-12 09:40:22瀏覽次數(shù)：317
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0669 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| NCI-H146 [H146]（小細胞肺癌細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0669 |
商品介紹：
名稱 NCI-H146 [H146]（小細胞肺癌細胞) 別稱H146; H-146; NCIH146 種屬人類 年齡（性別）男性，59歲 組織來源肺 生長特性懸浮細胞 細胞形態(tài)淋巴母細胞樣 背景描述Derived from the pleural fluid of a patient with small cell lung cancer; the cells express elevated levels of the 4 biochemical markers characteristic of SCLC: neuron-specific enolase, the brain isoenzyme of creatine kinase, L-dopa decarboxylase and bombesin-like immunoreactivity; the cells stain positively for keratin and vimentin but are negative for neurofilament triplet protein; the cells express relatively high amounts of c-myc mRNA, but no amplification of the gene is detected. 生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:3 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5% 溫度：37℃ 基因表達情況vasopressin negative; oxytocin negative; gastrin releasing peptide negative; vimentin positive by immunostaining; keratin positive by immunostaining; neurofilament triplet protein negative; c-myb mRNA; v-fms mRNA; Ha-ras mRNA; Ki-ras mRNA; N-ras mRNA; c-raf 1 mRNA; myc+; myb+; raf+; ras+; fms+; fes - 注意事項該細胞為懸浮細胞,，請注意離心收集細胞懸液,；請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。 |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
FVII / F7 基因全長ORF克隆
F2 / FII 基因全長ORF克隆
F9 / FIX 基因全長ORF克隆
CH25H 基因全長ORF克隆
PRKAB1 基因全長ORF克隆
SUV39H1 基因全長ORF克隆
EZH1 基因全長ORF克隆
TIPARP 基因全長ORF克隆
PDE7A 基因全長ORF克隆
DNMT1 基因全長ORF克隆
NCI-H146 [H146]（小細胞肺癌細胞) 15.6-1000 pg/mL 人神經(jīng)介素S(NMS)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ubiquilin-1
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Annexin A6
亞碲酸鹽卵黃增菌液 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5ml*10
0.156-10 ng/mL 人成纖維細胞生長因子22(FGF22)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Collagenase 3
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 19
乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基 英文名稱：Lactobacillus broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for DHEA sulfate
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