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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2025-02-24 15:25:19瀏覽次數(shù)：559
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0439 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| SK-N-MC (神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0439 |
商品介紹：
名稱 SK-N-MC (神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞) 別稱SKNMC; SK-NM-C; SK-NMC 年齡（性別）女,；14歲 組織來源腦；眶上區(qū)神經(jīng)上皮瘤轉(zhuǎn)移灶 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述SK-N-MC細(xì)胞是由Biedler·J·L建立的兩株神經(jīng)組織來源的細(xì)胞中的一株(另一株是SK-N-SH細(xì)胞),；于1971年9月分離得到,。SK-N-MC細(xì)胞有中度的多巴胺-β-羥化酶活性，也有可用甲醛誘導(dǎo)熒光指示的細(xì)胞內(nèi)兒茶酚胺,。最初被認(rèn)為是神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系,，但后來被證明來自于Askin腫瘤。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~32-48 hours 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in hamster cheek. Yes, in nude mice. 抗原表達(dá)情況Blood Type O; Rh+ |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
CCDC22 基因全長ORF克隆
CEP68 基因全長ORF克隆
RIPK2 基因全長ORF克隆
CYP4F11 基因全長ORF克隆
OXCT1 基因全長ORF克隆
PACSIN2 基因全長ORF克隆
ARFGAP1 基因全長ORF克隆
MSC 基因全長ORF克隆
PI4KB 基因全長ORF克隆
PFKP 基因全長ORF克隆
SK-N-MC (神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)0.1mL×10 XL1-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 XL1-Blue Competent Cell -80℃保存
2 ug pNTAP- C pNTAP- C 低溫運輸,，-20℃保存
200 mL 小鼠腫瘤細(xì)胞分離液1.070 Cell Separation Solution -20℃保存
1瓶 U14細(xì)胞株 U14 低溫運輸和保存
D/E中和肉湯 D/E Ｎeutralizing Broth 250g
100mg D- 果糖 -1,6- 二鈉鹽 D-Fructose-1,6-diphosphate -20℃保存
50T (229E/NL63)PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
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