詳細介紹
公司細胞現貨供應,,質量有保證,、*,、實驗效果好,,我司為您提供免費代測服務,,同時提供最新價格,、說明書,、規(guī)格,、用途、實驗原理等相關操作說明,。
產品名稱 | 小鼠腦動脈血管內皮細胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | GOY-01X1014 |
產品介紹:
名稱 小鼠腦動脈血管內皮細胞 2.組織來源:腦動脈組織 3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠腦動脈血管內皮細胞分離自腦動脈組織,;腦動脈有成對的頸內動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán),;靜脈系多不與同名動脈拌行,所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內靜脈,;各級靜脈都沒有瓣膜,,它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動脈血管內皮細胞主要功能:①維持血管內外的動態(tài)平衡,;②合成和分泌細胞因子和介質,;③維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠腦動脈血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠腦動脈血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產品貨號CM-M100 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,,5% |
細胞特點及處理:
產品特點: 1、 使用方便:不需昂貴設備,。 2,、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體,。 3,、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4,、 采用溫和的中性裂解組分,,保持蛋白活性。 5,、 含蛋白穩(wěn)定劑,,提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時,,背景干擾低,。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化,。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性,。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶,、天冬氨酸蛋白酶等,。 8、 本試劑盒中不有EDTA,,與金屬螯和層析等兼容。 | 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。 3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細胞培養(yǎng)技巧:
一,、凍存時的注意事項: 1. 在冷凍保存之前,,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,,例如是否有雜細胞或者支原體等,。 3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,,4 度避光保存,,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,,以高壓蒸汽 滅菌后避光保存,。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性,。 4. 冷凍保存的細胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后,。 4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml,。 4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,,若是不確定細胞之冷凍條件,,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,,以防止冷凍失敗,。
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ONPG 英文名稱: 產品規(guī)格:20支
LST-MUG 英文名稱:LST-MUG 產品規(guī)格:10ml*20支/包
0.156-10 ng/mL 豬內源性逆轉錄病毒(PERV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.312-20 ng/mL 人異質核核糖A2/B1(hnRNP A2/B1)ELISA試劑盒
62.5-4000 pg/mL 人畸胎瘤衍生生長因子1(TDGF1)ELISA試劑盒
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作,。 1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,,75%酒精消毒,拆下封口膜,,放入37℃,,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。 2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。 3. 細胞傳代 1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次,; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,,37℃溫浴3min左右,;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,,再加入*培養(yǎng)液終止消化,; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),; 4) 待細胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。 |