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詳細(xì)介紹
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1371 |
商品介紹：
名稱 大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞 2.組織來源：脊髓組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞分離自脊髓組織,；脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù)；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分,。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息,。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,，在椎管里面,，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),，分布到四肢,、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū),，主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成,；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成,；脊髓是許多簡單反射的中樞,。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)（稱為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官,。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),，31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的,。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，簡稱膠質(zhì)細(xì)胞,，是神經(jīng)組織中除神經(jīng)元以外的另一大類細(xì)胞,，也有突起，但無樹突和軸突之分,，廣泛分布于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng),。在哺乳類動物中，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元的細(xì)胞數(shù)量比例約為10：1,。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞主要有星形膠質(zhì)細(xì)胞,、少突膠質(zhì)細(xì)胞（與前者合稱為大膠質(zhì)細(xì)胞）和小膠質(zhì)細(xì)胞等。傳統(tǒng)認(rèn)為膠質(zhì)細(xì)胞屬于結(jié)締組織,，其作用僅是連接和支持各種神經(jīng)成分,，其實(shí)神經(jīng)膠質(zhì)還起著分配營養(yǎng)物質(zhì),、參與修復(fù)和吞噬的作用，在形態(tài),、化學(xué)特征和胚胎起源上都不同于普通結(jié)締組織,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含B-27 Supplement,、PDGF-AA、bFGF,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R238 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性不增殖,；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 CD157 / BST1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD157 / BST1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD79B / B29 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 KIT / c-KIT 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD68 / Macrosialin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD34 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 XEDAR / EDA2R 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞Saccharomyces cerevisiae雙氫睪酮檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白1檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白2檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白3檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白4檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白5檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae死亡受體5檢測試劑盒
Saccharomyces sp.四氫生物蝶呤檢測試劑盒
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