操作步驟:
1,、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液,。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,,固定于框架上,,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,,記錄各孔位置,,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,,再加樣本40μL(即樣本5倍),;空白對(duì)照孔不加。
4,、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
5、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板),。
6,、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對(duì)照孔不加,。
7,、溫育:重復(fù)4的操作。
8,、洗板:重復(fù)5的操作,。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,,再加入顯色劑B液 50μL,,37℃避光顯色15min,。
10、終止:取出酶標(biāo)板,,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11,、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測(cè)量各孔的吸光值(OD值),。
12,、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算,。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以倍數(shù),。
注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他檢測(cè)試劑盒請(qǐng)咨詢銷售人員,。
產(chǎn)品全稱:NOP58 核仁蛋白58elisa基本步驟
英文名稱:Nucleolar protein 58(NOP58)ELISA Kit
貨號(hào):GOY-01E11753
規(guī)格:48T/96T
服務(wù):可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),,以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光,、防潮
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一,、高效,、靈敏、特異的抗體,;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
三,、吸附性能好,,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,;
五,、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑 1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,,已獲得國家承認(rèn)的“三證",,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑,,值得您選擇,。 2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,,再進(jìn)行測(cè)定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,,以滿足后面的測(cè)定需求,。 | 二、樣本 1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子,、補(bǔ)體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,; 類風(fēng)濕因子的控制方法: ①用F(ab)2替代完整的IgG; ②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,; ③檢測(cè)抗原時(shí),,可用加入到標(biāo)本中使RF降解。 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2,、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3,、樣品(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6,、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水25倍,。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
重組 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
重組 FAM19A4 / TAFA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白
重組 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽)
重組狗 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白
重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
重組 CCL23 / MIP 3 蛋白
重組 CCL23 / MIP 3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NOP58 核仁蛋白58elisa基本步驟四基氫銨 離子對(duì)色譜級(jí),,≥99.0% (T)3,3-二甲基-1-丁炔 95%Anti-phospho-IRS1(Ser1101) 化胰島素受體底物-1抗體
分子篩4A 2mm-3mm,干燥劑用N-甲基-1-萘鹽酸鹽 97%Anti-phospho-IRS1(Ser302) 化胰島素受體底物-1抗體
分子篩, 5 ? 干燥劑用苯乙炔 97%Anti-phospho-IRS1(Ser332/336) 化胰島素受體底物-1抗體
13X分子篩 干燥劑用三苯基氯 97%Anti-phospho-IRS1(Ser612) 化胰島素受體底物-1抗體
10X分子篩 干燥劑用三苯 97%Anti-phospho-IRS1(Ser636/639) 化胰島素受體底物-1抗體
對(duì)甲酸 AR,99%呫噸-9-羧酸 98%Anti-phospho-IRS1(Ser789) 化胰島素受體底物-1抗體
4-基吡 98%2-甲 99%Anti-phospho-IRS1(Tyr1222) 化胰島素受體底物-1抗體
化亞銅 AR乙酰乙酸叔丁酯 95%Anti-phospho-IRS1(Tyr895) 化胰島素受體底物-1抗體