 |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
|
—— 銷售熱線 ——
18321818584 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-19 14:20:44瀏覽次數(shù)：277
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0961 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0961 |
商品介紹：
名稱 小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞 2.組織來源：大隱靜脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞分離自大隱靜脈,；大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側(cè)端,，經(jīng)內(nèi)踝前方,，沿小腿內(nèi)側(cè)緣伴隱神經(jīng)上行,，經(jīng)股骨內(nèi)側(cè)髁后方,，進(jìn)入大腿內(nèi)側(cè)部,，與股內(nèi)側(cè)皮神經(jīng)伴行,，逐漸向前上,，在恥骨結(jié)節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈,，其匯入點(diǎn)稱為隱股點(diǎn),。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈,、外靜脈,、股內(nèi)側(cè)淺靜脈和股外側(cè)淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣,，相互間吻合豐富,。大隱靜脈曲張行高位結(jié)扎時(shí)，須分別結(jié)扎,、切斷各屬支,，以防復(fù)發(fā)。大隱靜脈平滑肌細(xì)胞主要功能：①血管平滑肌細(xì)胞的生長(zhǎng)潛力是原發(fā)血管病發(fā)的重要異常因素,；②參與血管壁的炎癥反應(yīng),，并與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。因此,，研究大隱靜脈平滑肌細(xì)胞的代謝和信號(hào)通路是研究大隱靜脈擴(kuò)張等疾病的良好實(shí)驗(yàn)材料,。大隱靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M078 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 CKS1L 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 PSME1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 H2AFZ 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 BTF3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 AGTRAP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 SARNP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 ANAPC11 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 COX4I1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 LOC100911902 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 GSTM2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Heat shock-related 70 kDa protein 2
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Tissue alpha-L-fucosidase
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Urea transporter 1
0.156-10 ng/mL 人腺苷酸環(huán)化1(ADCY1)ELISA試劑盒
62.5-4000 nmol/L ELISA Kit for Hydroxyproline
0.156-10 ng/mL 人Ⅰ型脫碘 ELISA試劑盒
0.312-20 nmol/mL 甘油三脂(Triglyceride)ELISA試劑盒
氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱：Mannitol Salt Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
31.2-2000 pg/mL 人血管動(dòng)蛋白(AMOT)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 半(Cysteine)ELISA試劑盒
化工儀器網(wǎng)
化工儀器網(wǎng)