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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-18 15:45:23瀏覽次數(shù)：374
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0881 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0881 |
商品介紹：
名稱 胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 2.組織來(lái)源：胎盤(pán)組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 人胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞分離自胎盤(pán)組織；胎盤(pán)（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過(guò)渡性器官,，由羊膜,、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,，依靠胎盤(pán)從母體取得營(yíng)養(yǎng),，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤(pán)還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官,。有些爬行類和魚(yú)類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤(pán),。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成,。胚泡植入子宮內(nèi)膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,，以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,，外裹合體滋養(yǎng)層,，稱初級(jí)干絨毛。胚外中胚層長(zhǎng)入初級(jí)干絨毛的中軸,，使初級(jí)干絨毛變成了次級(jí)干絨毛,。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織，并與胚體內(nèi)的血管相通時(shí),，次級(jí)干絨毛改稱三級(jí)干絨毛,。三級(jí)干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育,，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤(pán),，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞采用胰蛋白酶-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-7免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H051 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 SERPINA11 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 Angiopoietin-like1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 VIM 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CHK2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 NR0B2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 LGALS8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 S100A3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 S100A5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 LGALS4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 Galectin-2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞精支原體肉湯培養(yǎng)基 英文名稱：Arginine Mycoplasma Broth Meium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Keratin, type I cytoskeletal 20
抗生素檢定培養(yǎng)基2號(hào)高PH8.0-8.2 英文名稱：Antibiotic Agar NO.2 （PH8.0-8.2） 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.78-50 mIU/mL ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 20
0.312-20 ng/mL 人葡糖神經(jīng)酰胺(Glucosylceramidase)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Cardiotrophin-like cytokine factor 1
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂（YPD）平板 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：9cm*10/包
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Neuromedin-U
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Thioredoxin-dependent peroxide reductase, mitochondrial
0.156-10 ng/mL 人尾加壓素2B(Urotensin-2B)ELISA試劑盒
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