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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-18 14:41:41瀏覽次數(shù)：222
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0843 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 兔羊膜胚胎細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0843 |
商品介紹：
名稱 兔羊膜胚胎細(xì)胞 2.組織來源：羊膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 兔胚胎羊膜細(xì)胞分離自羊膜組織,；羊膜為單層上皮細(xì)胞互相連接構(gòu)成的薄膜。單層上皮細(xì)胞具有分泌羊水的作用,。隨著胚胎的生長發(fā)育,，羊膜與絨毛密切緊貼，形成胎膜,。胎膜隨著羊膜腔逐漸擴(kuò)大而呈半透明的薄膜,，無血管，富有韌性（胎膜也就是羊膜腔的囊壁）,。羊膜腔內(nèi)充滿的液體為羊水,。羊膜僅覆蓋在胎盤的兒體面，并不深入胎盤組織中,，隨著妊娠的進(jìn)展羊膜腔逐漸擴(kuò)大,，占據(jù)整個子宮腔，羊膜是胎膜最內(nèi)一層,，是一層半透明的薄膜,，與覆蓋在胎盤、臍帶的羊膜層相連接,。羊膜是胎盤的最內(nèi)層,，與人眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞,，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì),，其光滑，無血管,、神經(jīng)及淋巴,，具有一定的彈性，厚0.02~0.5mm,，在電鏡下，其分為五層：上皮層,、基底膜,、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層,，羊膜基底膜和羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,，主要為i,、iii、iv,、v,、vii型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份,，正是這些成份使羊膜可以充當(dāng)“移植的基底膜"而發(fā)揮一種新的健康合適的基質(zhì),。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能,，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能,。 5.方法簡介： 實驗室分離的兔羊膜胚胎細(xì)胞采用胰-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的兔羊膜胚胎細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-Rb040 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳3-5代左右 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 YWHAG 基因全長ORF克隆
小鼠 HCRTR2 基因全長ORF克隆
小鼠 YWHAB 基因全長ORF克隆
小鼠 GRK5 基因全長ORF克隆
小鼠 Smad1 基因全長ORF克隆
小鼠 MAP3K3 / MEKK3 基因全長ORF克隆
小鼠 MAPKAPK3 基因全長ORF克隆
小鼠 PDPK1 基因全長ORF克隆
小鼠 STK11 基因全長ORF克隆
小鼠 FASLG / FASL 基因全長ORF克隆
兔羊膜胚胎細(xì)胞0.078-5 ng/mL 人β防御素124(Beta-defensin 124)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL 人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人血小板衍生生長因子B(PDGF subunit B)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/ml ELISA Kit for Human Dipeptidyl peptidase 1
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Gamma-Aminobutyric acid
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-defensin 119
78-5000 pg/mL 人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human GDNF family receptor alpha-1
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cytidine deaminase
JM培養(yǎng)基基礎(chǔ) 英文名稱：JM Medium Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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