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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-02-24 08:13:10瀏覽次數(shù)：324
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0933 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠腎足突細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0933 |
商品介紹：
名稱 小鼠腎足突細(xì)胞 2.組織來源：腎組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠腎足突細(xì)胞分離自腎組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢，被鮑氏囊所包裹,，是尿液形成的重要構(gòu)造,。血液經(jīng)由入球小動脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,，匯流入靜脈,，而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),，微血管受到高壓,，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,，形成濾液,，滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率,。足細(xì)胞（podocyte）即腎小囊臟層上皮細(xì)胞，它附著于腎小球基底膜（GBM）的外側(cè),，連同GBM和毛細(xì)血管內(nèi)皮一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障,。足細(xì)胞特殊的解剖位置，使得其體內(nèi)研究較為困難,；又由于正常成年機(jī)體的腎臟足細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,，體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞不能增殖。足細(xì)胞呈星型多突狀,，胞體較大,，由胞體伸出許多突起，又稱足突（FP）,，呈指狀交叉復(fù)蓋于GBM外表面,，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細(xì)胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分,，IV型膠原和纖維連接蛋白（FN）,；在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）和組織蛋白酶，從而在GBM的代謝平衡中發(fā)揮重要作用,。足細(xì)胞之間鄰近的足突相互交替,，形成了許多30-40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜,，即腎小球足突間裂孔隔膜,。后者是血漿蛋白通過脈管系統(tǒng)的最后屏障，對于維持腎小球?yàn)V過屏障結(jié)構(gòu)與功能完整性發(fā)揮關(guān)鍵作用,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎足突細(xì)胞采用機(jī)械研磨過不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩結(jié)合膠原酶消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎足突細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M067 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 MYOT 基因全長ORF克隆
大鼠 PTBP1 基因全長ORF克隆
大鼠 YWHAZ 基因全長ORF克隆
大鼠 CPXM1 基因全長ORF克隆
大鼠 NCSTN 基因全長ORF克隆
大鼠 SC5D 基因全長ORF克隆
大鼠 NUCB1 基因全長ORF克隆
大鼠 CAPN6 基因全長ORF克隆
大鼠 DDX18 基因全長ORF克隆
大鼠 HSP90AB1 基因全長ORF克隆
小鼠腎足突細(xì)胞3%NaCl 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Gastrokine-2
1.56-100 ng/mL 人基礎(chǔ)免疫球蛋白(Basigin)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Propionyl-CoA carboxylase beta chain, mitochondrial
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Gamma-secretase subunit PEN-2
固氮菌用阿須貝氏培養(yǎng)基 英文名稱：Nitrogen-fixing bacteria with the A Sugai’s medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
增菌肉湯培養(yǎng)基E 英文名稱：Enrichmentbroth medium E 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Macrophage mannose receptor 1
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Vigilin
大腸桿菌／大腸菌群顯色培養(yǎng)基(第二代) 英文名稱：E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 產(chǎn)品規(guī)格：1000(ML)
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